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1. (WO1985005685) CATALYZED NUCLEIC ACID HYBRIDIZATION USING ENZYMATIC REAGENT
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/1985/005685    International Application No.:    PCT/US1985/001026
Publication Date: 19.12.1985 International Filing Date: 31.05.1985
IPC:
C12Q 1/68 (2006.01)
Applicants: NATIONAL BIOMEDICAL RESEARCH FOUNDATION [US/US]; 3900 Reservoir Road, N.W., Washington, DC 20007 (US)
Inventors: ZAPOLSKI, Edward, J.; (US).
GERSTEN, Douglas, M.; (US).
LEDLEY, Robert, S.; (US)
Agent: SEEBER, Joseph, G.; Post Office Box 750, Great Falls, VA 22066 (US)
Priority Data:
616,205 01.06.1984 US
Title (EN) CATALYZED NUCLEIC ACID HYBRIDIZATION USING ENZYMATIC REAGENT
(FR) HYBRIDATION D'ACIDES NUCLEIQUES CATALYSES UTILISANT UN REACTIF ENZYMATIQUE
Abstract: front page image
(EN)A hybridization method for treating target DNA fragments to identify known genetic sequences comprises the following steps: disposing the target DNA fragments on a carrier, either a dried gel film or a blotting matrix to which the target DNA fragments are transferred by the southern blotting technique or a variation thereof; forming a hybridization reagent consisting of a radioactive-labelled probe DNA and catalyzing enzymes and cofactors; immersing the carrier in the hybridization reagent for a given period of time; washing the carrier in at least one wash solution; exposing an x-ray film to the carrier; and developing the x-ray film to detect and locate the radioactive-labelled probe DNA. The catalyzing enzymes utilized in forming the hybridization reagent include RecA protein and SSB DNA binding protein in the presence of ATP.
(FR)Un procédé d'hybridation pour le traitement de fragments ADN cibles pour identifier des séquences génétiques connues comprend les étapes suivantes: application des fragments ADN cibles sur un support, soit un film de gel séché soit une matrice buvard sur laquelle les fragments d'ADN cible sont transférés par la technique buvard Sud ou une variante de celle-ci; formation d'un réactif d'hybridation consistant en ADN d'investigation marqué par radioactivité et des enzymes de catalyse et des cofacteurs; immersion du support dans le réactif d'hybridation pendent une période de temps donnée; lavage du support dans au moins une solution de lavage; exposition d'un film à rayon x sur le support; et développement du film à rayon x pour détecter et situer l'ADN d'investigation marqué par radioactivité. Les enzymes de catalyse utilisées dans la formation du réactif d'hybridation comprenent une protéine RecA et une protéine de liaison ADN SSB (à simple brin) en présence d'ATP (adénosine triphosphate).
Designated States: JP.
European Patent Office (CH, DE, FR, GB, IT, NL, SE).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)