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1. (WO1983004054) A METHOD FOR DETERMINATION OF DEOXYTHYMIDINE KINASE (dTk) ISOENZYME ACTIVITY AND USE THEREOF FOR THE DIAGNOSIS OF DISEASES
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/1983/004054    International Application No.:    PCT/SE1983/000190
Publication Date: 24.11.1983 International Filing Date: 10.05.1983
IPC:
C12Q 1/50 (2006.01)
Applicants: GRONOWITZ, Jan-Simon [SE/SE]; (SE).
KÄLLANDER, Clas, Fredrik, Runesson [SE/SE]; (SE)
Inventors: GRONOWITZ, Jan-Simon; (SE).
KÄLLANDER, Clas, Fredrik, Runesson; (SE)
Agent: KUMMELSTEN, Per, Arne @; Uppsala Patentbyra^o, Box 9039, S-750 09 Uppsala (SE)
Priority Data:
8203041-2 14.05.1982 SE
Title (EN) A METHOD FOR DETERMINATION OF DEOXYTHYMIDINE KINASE (dTk) ISOENZYME ACTIVITY AND USE THEREOF FOR THE DIAGNOSIS OF DISEASES
(FR) PROCEDE DE DETERMINATION DE L'ACTIVITE ISOENZYMATIQUE DE LA DESOXYTHYMIDINE KINASE (dTk) ET SON UTILISATION DANS LE DIAGNOSTIC DE MALADIES
Abstract: front page image
(EN)A method of determining dTk isoenzyme levels of a human or animal body fluid or cell sample, which comprises the steps of reacting said sample with a substrate for said isoenzyme in the presence of a phosphate donor and a buffer system, and measuring the amount of phosphorylated product formed, said amount being proportional to said isoenzyme level. The method is characterized by using in combination (a) a buffer system at pH ranging from 5 to 9 and being present in a concentration of no more than 250 mM, (b) a substrate consisting of 2'-deoxy-5-halouridin, part of which has a radio-labelled 5-halogen, and being present in a concentration ranging from 2 x 19?-9¿ - 5 x 10?-6¿M, and (c) the phosphate donor being present in a concentration not exceeding 20 mM. The sensitivity of the method permits measurement of minute amounts of dTk, and the method can be used for e.g. diagnosis, prognostics and monitoring of diseases involving alterated ATP mediated dTk activity, such as cancers, tumours, and certain virus infections, or alterated CTP mediated dTk activity, such as HSV type 1, type2, and VZV infections.
(FR)Un procédé de détermination des niveaux de l'isoenzyme dTk d'un échantillon de cellules ou d'un fluide d'un corps humain ou animal comprend les étapes qui consistent à faire réagir cet échantillon avec un substrat pour cette isoenzyme en présence d'un donneur de phosphate et d'un système tampon, et à mesurer la quantité du produit phosphorylé formé, cette quantité étant proportionnelle au niveau isoenzymatique. Le procédé se caractérise par l'utilisation, en combinaison, de a) un système tampon ayant un pH compris entre 5 et 9 et étant présent dans une concentration n'excédant pas 250 mM, b) un substrat consistant en 2'-désoxy-5-halouridine, dont une partie possède un atome d'halogène radio-marqué en position 5, et étant présent avec une concentration comprise entre 2 x 10?-9¿ et 5 x 10?-6¿ M, et c) le donneur de phosphate étant présent avec une concentration n'excédant pas 20 mM. La sensibilité du procédé permet d'effectuer des mesures de très petites quantités de dTk, et le procédé peut être utilisé par exemple pour effectuer des diagnostics, des pronostics et contrôler des maladies comportant une activité dTk par médiation d'adénosinetriphosphate (ATP), tels que les cancers, les tumeurs et certaines infections virales, ou une activité dTk par médiation de cytidinetriphosphate (CTP) altéré, tels que les infections HSV (virus de l'herpes simplex) du type 1, du type 2 et les infections VZV (virus de la varicelle Zoster).
Designated States: AU, DK, FI, JP, NO, US.
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)