(KO) 미생물 트랜스글루타미나제 (MTG)를 사용한 단백질의 부위-특이적 변형은 생리학적 조건 하에서 제어된 방식으로 단백질을 변형시킬 수 있는 강력한 다용도 전략법이다. 본 발명자들은 scFV, Fab-단편 및 항체를 포함한, 치료 관련 단백질에 추가의 하류 적용에 중요한 상이한 관능성 분자를 부위-특이적으로 및 효율적으로 부착시키는데 고체-상 마이크로비드 고정화가 사용될 수 있다는 증거를 제공한다. 본 발명자들은 MTG는 검출가능한 칼럼 블리딩 없이, 단단히 고정화된 상태 그대로 유지되었고, 효소 활성은 연속 조작 동안 그대로 지속되었고, 이를 통해, 효소는 편리하게 재사용될 수 있었는 바, 이에, 용액-상 MTG 접합을 넘어서서 그보다 우수하다는 것을 증명한다. 추가적으로, 고정화된 MTG는, 접합이 용액 중에서 수행되었다면, 모두가 표적화되는 수개의 반응성 잔기의 존재 하에 특정 잔기에 대하여 증진된 선택성을 보인다는 것을 제시한다. 고정화된 MTG 및 용액 중 MTG를 사용한, 강력한 글루타민 함유 펩티드를 사용하는 항체의 부위-특이적 리신 접합을 또한 보고한다. 추가적으로, 고정화된 MTG 및 용액 중 MTG를 사용한, 이중 부위-특이적으로 접합된 IgG1의 생성, 즉, IgG1 항체의 글루타민 및 리신 잔기에의 부위-특이적 접합을 보고한다. 리신 잔기 및 관능성 모이어티를 함유하는 소형 펩티드와의 부위-특이적 글루타민 접합을 또한 기술한다.