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1. CN109724949 - Preparation method of up-conversion luminescence flexible hybrid membrane for visual detection of tumor markers

Note: Text based on automatic Optical Character Recognition processes. Please use the PDF version for legal matters

[ ZH ]

权利要求书

1.一种用于肿瘤标志物可视化检测的上转换发光柔性杂化膜的制备方法,其特征在于,该方法具体包括以下步骤:
(1)将块状黑磷晶体研磨成粉末,加入溶解了金属盐的极性溶剂中,采用探头和浴池超声剥离出黑磷纳米片,加入硫醇配体,通过超声辅助溶剂热制备金属离子掺杂的黑磷量子点M-BPQDs;
(2)依据Stöber法在M-BPQDs 表面生长介孔二氧化硅mSiO 2 ,然后进行-NH 2 功能化改性制得M-BPQDs/mSiO 2 -NH 2 ,再与单链DNA1通过羧-胺偶联反应结合,制备M-BPQDs/mSiO 2 @DNA1;
(3)电子受体分子进入mSiO 2 孔道内完成受体分子负载,添加特异性适体单链DNA2与DNA1碱基互补配对形成双螺旋结构,封装受体分子,得到纳米杂化物载体探针M-BPQDs/mSiO 2 @DNA1-DNA2@受体;
(4)以聚异丁烯酸甲酯PMMA为层状基底,表面黏合一层聚酰亚胺PI,电极夹固定PMAA-PI 薄膜浸没在电解液中,以KCl 饱和甘汞电极为参比,铂丝电极为辅助,PMAA-PI 薄膜为工作电极,在电解液中加入HAuCl 4 ,循环伏安扫描,在薄膜表面电化学还原生成金纳米颗粒AuNPs制得PMMA-PI-AuNPs复合薄膜;
(5)探针上DNA1末端-SH与薄膜上AuNPs通过Au-S键结合,将薄膜与探针连接在一起构筑成柔性杂化膜,当生物流体样品中含有肿瘤标志物时,将其滴加至该杂化膜上,在近红外光激发下观察浸润杂化膜的上转换发光颜色变化,实现对肿瘤标志物的可视化检测。

2.根据权利要求1所述的一种用于肿瘤标志物可视化检测的上转换发光柔性杂化膜的制备方法,其特征在于,步骤(1)中所述的金属离子为Ag+, Mn2+, Co2+, Ni2+,M-BPQDs为1~5nm。

3.根据权利要求1所述的 一种用于肿瘤标志物可视化检测的上转换发光柔性杂化膜的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述的表面mSiO 2 厚度为50~200 nm。

4.根据权利要求1所述的一种用于肿瘤标志物可视化检测的上转换发光柔性杂化膜的制备方法,其特征在于,步骤(3)中所述的受体为5-氟尿嘧啶、多巴胺、芦丁、槲皮素,DNA2是癌胚抗原、甲胎蛋白、糖类抗原、前列腺特异性抗原标志物的单链DNA适体。

5.根据权利要求1所述的一种用于肿瘤标志物可视化检测的上转换发光柔性杂化膜的制备方法,其特征在于,步骤(4)中所述的PMMA厚度为50~100 nm,PI厚度为1~2 μm,AuNPs厚度为10~100 nm。

6.根据权利要求1所述的一种用于肿瘤标志物可视化检测的上转换发光柔性杂化膜的制备方法,其特征在于, 步骤(5)中所述的上转换发光发射峰波长为500~600 nm,肿瘤标志物浓度为1 nM~1 mM。