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1. KR1020030062404 - 2-GUANIDINO-4-ARYL-QUINAZOLINE

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[ KO ]
명 세 서
2-구아니디노-4-아릴퀴나졸린{2-GUANIDINO-4-ARYLQUINAZOLINES}
기술분야
본 발명은 화학식 I의 화합물:
화학식 I
(상기 식에서,
Y는 또는 이고,
Ar은 각각 치환되지 않거나 R 3 및/또는 R 4에 의해 일치환되는 페닐 또는 나프틸이고,
R 1, R 2, R 3 및 R 4는 각각, 서로 독립적으로, H, A, OA, Hal, CF 3, OH, NO 2, NH 2, NHA, NA 2, NH-CO-A, NH-CO-Ph, SA, SO-A, SO 2-A, SO 2-Ph, CN, OCF 3, CO-A, CO 2H, CO 2A, CO-NH 2, CO-NHA, CO-NA 2, SO 2NH 2, SO 2 NHA, SO 2NA 2, 또는 치환되지 않거나 A, OA, Hal 또는 CF 3에 의해 일치환 또는 다치환되는 페닐이고,
A는 탄소수 1, 2, 3, 4, 5 또는 6을 갖는 알킬이고,
Hal은 F, Cl, Br 또는 I이고,
R 5, R 6, R 7 및 R 8은 각각, 서로 독립적으로, H, A, 또는 치환되지 않거나 A, OA, Hal 또는 CF 3에 의해 일치환 또는 다치환되는 페닐이고, R 5와 R 7, R 5와 R 6, 및 R 7과 R 8은 5-7-원 고리를 형성할 수 있고,
R 5, R 6, R 7 및 R 8은 동시에 H이고 라디칼 R 1, R 2, R 3 및 R 4 중 어느 것도 OH, NO 2, NH 2, NHA, NA 2, NH-CO-A, NH-CO-Ph, SA, SO-A, SO 2-A, SO 2-Ph, CN, OCF 3, CO-A, CO 2H, CO 2A, CO-NH 2, CO-NHA, CO-NA 2, SO 2NH 2 , SO 2NHA, SO 2NA 2, 또는 치환되지 않거나 A, OA, Hal 또는 CF 3에 의해 일치환 또는 다치환되는 페닐이 아닌 화합물을 배제하는 것을 조건으로 한다)
및 이의 염과 용매화물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 NHE-3 저해제로서의 화학식 I의 화합물 및 이의 염과 용매화물의 용도에 관한 것이다.
배경기술
나트륨/양성자 교환체 서브타입(subtype) 3의 다른 저해제는 예를 들어, EP 0 825 178에 이미 기재되어 있다. 조건에 의해 배제되는 화합물은 다른 목적을 위한 용도를 갖는 것으로 이미 US 3,131,187에 기재되어 있다. 퀴나졸리닐구아니딘 유도체는 문헌(V.I. Shvedov et al. in Pharm. Chem. J. (Engl. transl.) 1980, 14, 532-538 또는 in Khim. Farm. Zh. 1980, 14, 38-43, 및 by S.C.Bell et al. in J.Med. Pharm. Chem. 1962, 5, 63-69)에 기재되어 있다.
발명의 상세한 설명
본 발명은 유용한 특성을 갖는 신규 화합물, 특히 약제의 제조에 사용될 수 있는 신규 화합물을 발견하고자 하는 목적을 가진다.
놀랍게도, 화학식 I의 화합물 및 이의 염은 내성이 우수하고 나트륨/양성자 교환체 서브타입 3을 저해하는 것으로 밝혀졌다. 화학식 I의 화합물은 인간과 동물의 의약에서 약제 활성 성분으로 사용될 수 있다.
Na +/H + 교환체는 여섯 가지 이상의 서로 다른 동질이성체(isoform; NHE-1 내지 NHE-6)를 갖는 군(family)을 나타내며, 이들 모두는 이미 클로닝된 것으로 알려져 있다. 서브타입 NHE-1은 체내의 모든 조직에 존재하도록 분포되어 있는 반면, 다른 NHE 서브타입은 신장에서 또는 소장의 루멘 벽 및 내강 벽에서와 같은 특정 기관에서 선택적으로 발현된다. 이러한 분포는, 다양한 동질이성체가 제공하는 특정 기능, 즉 한편으로는 서브타입 NHE-1에 의한 세포내 pH 및 세포 부피 조절, 및 다른 한편으로는 동질이성체 NHE-2 와 NHE-3에 의한 장과 신장에서의 Na + 흡수 및 재흡수를 반영한다. 동질이성체 NHE-4는 주로 위에서 발견되어 왔다. NHE-5의 발현은 뇌 및 신경 조직에 제한된다. NHE-6은 미토콘드리아 내에서 나트륨/양성자 교환체를 형성하는 동질이성체이다.
동질이성체 NHE-3은 특히 근위 세뇨관(proximal renal tubuli)의 선단 막에서 발현된다; 따라서, NHE-3 저해제는 특히 신장에 대한 보호 작용을 나타낸다.
NHE-3 동질이성체에 대한 선택적 저해제의 치료적 용도는 다양하다. NHE-3 저해제는, 신장 허혈 동안이나, 신장 이식 시 신장의 제거, 수송 및 재관류(reperfusion) 동안의 경우와 같은, NHE 작용을 활성화하는 병태 생리학적 저산소증 및 허혈 후의 조직 손상 및 세포 괴사를 저해하거나 감소시킨다. 화학식 I의 화합물은 산소가 저공급된 기관의 세포에 나트륨 및 물이 과도하게 흡수되는 것을 방지한다는 점에서, 세포 보호 작용을 갖는다.
화학식 I의 화합물은 저혈압 작용을 가지며, 고혈압 치료용 약제 활성 성분으로 적합하다. 이들은 또한 이뇨제로 적합하다. 화학식 I의 화합물은 단독으로 또는 다른 서브타입 특이성을 갖는 NHE 저해제와 함께 항허혈 작용을 가지며, 혈전증, 아테로마성 동맥경화증, 혈관경련의 경우에, 예를 들어 신장 및 간과 같은 기관을 보호하기 위해, 수술 전 및 수술 중에, 및 만성 또는 급성 신부전의 경우에 사용할 수 있다.
이들은 또한 졸중, 뇌부종, 신경계의 허혈, 다양한 형태의 쇼크, 예를 들어, 알레르기성, 심장병성, 혈액량 감소 또는 박테리아성 쇼크를 치료하기 위하여, 및 예를 들어, 하기의 상태: 중추 수면성 무호흡, 유아 급사, 외과 수술 후 저산소증 및 다른 호흡 장애에서의 호흡 상태를 개선하기 위해 사용될 수 있다.
탄산탈수효소 저해제와의 조합을 통해, 호흡 작용을 더욱 개선시킬 수 있다. 화학식 I의 화합물은 세포 증식, 예를 들어 섬유아세포 증식 및 평활근 세포증식에 대한 저해 효과를 가지므로, 세포 증식이 일차 또는 이차 원인인 질병의 치료에 사용될 수 있다. 화학식 I의 화합물은 당뇨병의 지발성 합병증, 암 질환, 섬유증 질환, 내피 기능부전, 기관 비대증 및 발육부전, 특히 전립선 발육부전 또는 전립선 비대증에 사용할 수 있다. 이들은 또한 특정 형태의 고혈압, 아테로마성 동맥경화증, 당뇨병 및 증식성 질환을 확인 및 구별하기 위한 진단제로 적합하다. 화학식 I의 화합물은 또한 혈청 지단백질 수준에 유리한 영향을 미치므로, 증가된 혈중 지방 수준의 치료를 위해 단독으로 또는 다른 약제와 함께 사용될 수 있다.
본 발명은 혈전증, 심장, 말초 및 중추 신경계 및 졸중의 허혈 상태, 말초 기관 및 사지의 허혈 상태의 치료 및 쇼크 상태의 치료를 위한, 특허청구범위 제 1항에 따른 화학식 I의 화합물 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및/또는 용매화물의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 또한, 외과적 수술 및 기관 이식에 사용되며 외과적 측정을 위한 이식물의 보존 및 저장용 약제를 제조하기 위한, 특허청구범위 제 1항에 따른 화학식 I의 화합물 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및/또는 용매화물의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 또한, 세포 증식이 일차 또는 이차 원인인 질병의 치료, 지방 신진대사 질환 또는 호흡 장애의 치료 및 예방용 약제를 제조하기 위한, 특허청구범위 제 1항에 따른 화학식 I의 화합물 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및/또는 용매화물의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 또한, 신장 허혈, 허혈성 장 질환의 치료 또는 급성 또는 만성 신장 질환의 예방용 약제를 제조하기 위한, 특허청구범위 제 1항에 따른 화학식 I의 화합물 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및/또는 용매화물의 용도에 관한 것이다.
나트륨/양성자 교환체 서브타입 3을 저해하는 물질의 확인 방법은 예를 들어 US 5,871,919에 기재되어 있다.
또한 화학식 I의 화합물은 세균성 및 기생충성 질환의 치료에 적합하다.
예를 들어 A와 같이 한번 이상 나오는 화학식 I의 화합물의 모든 라디칼은 그 의미가 상호 독립적이다.
예를 들어, 수화물이라는 용어는 헤미-, 모노- 또는 디하이드레이트를 의미하며, 용매화물이라는 용어는 예를 들어 메탄올 또는 에탄올과 같은 알콜 부가 화합물 등을 의미한다.
상기 화학식에서, A는 알킬이고, 직쇄 또는 분지쇄이며, 탄소수 1, 2, 3, 4, 5 또는 6을 가진다. A는 메틸, 또한 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, 2차-부틸 또는 3차-부틸, 또한 펜틸, 1-, 2- 또는 3-메틸부틸, 1,1-, 1,2- 또는 2,2-디메틸프로필, 1-에틸프로필, 헥실, 1-, 2-, 3- 또는 4-메틸펜틸, 1,1-, 1,2-, 1,3-, 2,2-, 2,3- 또는 3,3-디메틸부틸, 1- 또는 2-에틸부틸, 1-에틸-1-메틸프로필, 1-에틸-2-메틸프로필, 또는 1,1,2- 또는 1,2,2-트리메틸프로필이 바람직하다.
OA는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시 또는 부톡시가 바람직하다.
Hal은 F, Cl 또는 Br, 또한 I, 특히 F, Cl 또는 Br이 바람직하다.
상기 및 하기에서, 별도의 언급이 없다면, Ph는 치환되지 않은 페닐 라디칼이다.
Ar은 치환되지 않은 페닐 또는 나프틸이 바람직하고, 또한 예를 들어 A, 플루오르, 염소, 브롬, 요오드, 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시 또는 CF 3에 의해 일치환되는 페닐 또는 나프틸이 바람직하다. Ar은 치환되지 않거나 A, 플루오르, 염소, 브롬, 요오드, 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시 또는 CF 3에 의해 치환되는 페닐이 특히 바람직하다.
R 5, R 6, R 7 및 R 8은 동시에 H이거나, 서로 독립적으로 H 또는 상기한 바와 같은 A인 것이 바람직하다.
R 5와 R 7이 함께 고리를 형성할 경우, Y는 하기의 구조:
또는
(상기 식에서, R 6 및 R 8은 상기 정의한 바와 같고, n은 1, 2 또는 3이고, 1 또는 2인 것이 바람직하다)
중 하나를 채택하는 것이 바람직하다.
R 7와 R 8이 함께 고리를 형성할 경우, Y는 하기의 구조:
또는
(상기 식에서, R 5 및 R 6은 상기 정의한 바와 같고, n은 1, 2 또는 3이고, 1 또는 2인 것이 바람직하다)
중 하나를 채택하는 것이 바람직하다.
R 5와 R 6이 함께 고리를 형성할 경우, Y는 하기의 구조:
또는
(상기 식에서, R 7 및 R 8은 상기 정의한 바와 같고, n은 1, 2 또는 3이고, 1 또는 2인 것이 바람직하다)
중 하나를 채택하는 것이 바람직하다.
따라서, 본 발명은 특히 상기 라디칼 중 하나 이상이 상기된 바람직한 의미 중 하나를 갖는 화학식 I의 화합물의 용도에 관한 것이다. 화합물 중 몇가지 바람직한 그룹을, 화학식 I과 동일하며 상세히 언급되지 않은 라디칼은 화학식 I에서의 의미를 갖는 하기 화학식 Ia 내지 Il로 나타낼 수 있다.
Ia에서, R 1은 H, OH, OA, SA 또는 Hal, 특히 H, OH, OCH 3 또는 CH 3이고;
Ib에서, R 1은 H, OH, OA, SA 또는 Hal, 특히 H, OH, OCH 3 또는 CH 3이고,
R 2는 H, Hal, OH, A, NH 2, NO 2 또는 CN, 특히 H, Cl, OH, CH 3 또는 NH 2이고;
Ic에서, R 1은 H, OH, OA, SA 또는 Hal, 특히 H, OH, OCH 3 또는 CH 3이고,
R 2는 H, Hal, OH, A, NH 2, NO 2 또는 CN, 특히 H, Cl, OH, CH 3 또는 NH 2이고,
Ar은 페닐이고;
Id에서, R 1은 H, OH, OA, SA 또는 Hal, 특히 H, OH, OCH 3 또는 CH 3이고,
R 2는 H, Hal, OH, A, NH 2, NO 2 또는 CN, 특히 H, Cl, OH, CH 3 또는 NH 2이고,
Ar은 페닐이고,
R 3는 H, A, NH 2 또는 SA, 특히 H 또는 CH 3이고;
Ie에서, R 1은 H, OH, OA, SA 또는 Hal, 특히 H, OH, OCH 3 또는 CH 3이고,
R 2는 H, Hal, OH, A, NH 2, NO 2 또는 CN, 특히 H, Cl, OH, CH 3 또는 NH 2이고,
Ar은 페닐이고,
R 3는 H, A, NH 2 또는 SA, 특히 H 또는 CH 3이고,
R 4는 H, Hal, NH 2 또는 NO 2, 특히 H 또는 NH 2이다.
R이 동시에 H이고, Ar이 페닐이며 라디칼 R 1, R 2, R 3 및 R 4 중 하나 이상이 OH, NO 2, NH 2, NHA, NA 2, NH-CO-A, NH-CO-Ph, SA, SO-A, SO 2-A, SO 2-Ph, CN, OCF 3, CO-A, CO 2H, CO 2A, CO-NH 2, CO-NHA, CO-NA 2, SO 2NH 2, SO 2NHA, SO 2NA 2, 또는 치환되지 않거나 A, OA, Hal 또는 CF 3에 의해 일치환 또는 다치환되는 페닐 중 하나의 의미를 갖는, 화학식 I의 화합물 및 이의 염과 용매화물이 바람직하다. 이러한 화합물 중에서, 라디칼 R 1이 Cl, 특히 6 위치에 있는 화합물, 및 라디칼 R 3가 메틸, 특히 4' 위치에 있는 화합물이 특히 바람직하다.
또한 라디칼 R 5, R 6, R 7 및 R 8이 동시에 H인 화학식 I의 화합물 및 이의 염과 용매화물이 바람직하다. 이러한 화합물 중에서, 라디칼 R 1이 Cl, 특히 6 위치에 있는 화합물, 및 라디칼 R 3가 메틸, 특히 4' 위치에 있는 화합물, 및 라디칼 R 4가 NH 2, 특히 2' 위치에 있는 화합물이 특히 바람직하다.
라디칼 R 3가 메틸, 특히 4' 위치에 있는 화학식 I의 화합물은 NHE-3 수용체에 대한 결합에 대해 특별히 공인된 선택성을 가진다.
라디칼 R 4가 NH 2, 특히 2' 위치에 있는 화학식 I의 화합물은 수용액에서 특히 우수한 용해성을 나타낸다.
R 1이 H이고, R 2가 6 위치에 있는 Cl이며 R 3가 4' 위치에 있는 메틸인 화학식 I의 화합물이 바람직하다. 또한 라디칼 R 4가 2' 위치에 있는 NH 2인 화학식 I의 화합물이 특히 바람직하다.
하기의 화학식 If 내지 Ik의 화합물이 특히 바람직하다:
화학식 If
화학식 Ig
화학식 Ih
화학식 Ii
화학식 Ij
화학식 Ik
(상기 식에서,
R 1, R 2, R 3, R 4 및 Y는 상기 정의한 바와 같고, R 1은 H, OH, OA, SA 또는 F, 특히 H, OH, OCH 3 또는 CH 3인 것이 바람직하다). 화학식 If 내지 Ik에 있는 R 1 은 H인 것이 특히 바람직하다.
R 2는 H, Cl, A, NH 2, NO 2, SCH 3, SOCH 3, SO 2 CH 3, OCH 3, OH, CN, CF 3, OCF 3 또는 F, 특히, H, Cl, F, Br, OH, CH 3, NO 2 또는 NH 2인 것이 바람직하다. 화학식 If 내지 Ik에 있는 R 2는 Cl인 것이 매우 특히 바람직하다.
R 3는 H, Cl, A, NH 2, NO 2, SCH 3, CN, C 2H 5 , OCF 3 또는 C 6H 5, 특히, H, A 또는 CH 3인 것이 바람직하다. 화학식 If 내지 Ik에 있는 R 3는 CH 3인 것이 매우 특히 바람직하다.
R 4는 H, F, NH 2 또는 NO 2, 특히 H 또는 NH 2인 것이 바람직하다. 화학식 If 내지 Ik에 있는 R 4는 NH 2인 것이 매우 특히 바람직하다.
화학식 If 내지 Ik에 있는 Y는 상기한 바와 같다. 상기 식에서, Y는 하기의 의미 중 하나를 채택하는 것이 바람직하다:
또는 ,
또는 ,
또는 ,
또는 ,
또는 .
Y는 하기의 의미 중 하나를 갖는 것이 특히 바람직하다:
또는 ,
또는 .
또한 하기의 화학식 I1내지 I10의 화합물 및 이의 염과 용매화물이 특히 바람직하다:
화학식 I1
N-(6-클로로-4-페닐퀴나졸린-2-일)-N'-메틸구아니딘
화학식 I2
N-(6-클로로-4-p-톨일퀴나졸린-2-일)-N'-메틸구아니딘
화학식 I3
N-[6-클로로-4-(2-니트로페닐)퀴나졸린-2-일]-N'-메틸구아니딘
화학식 I4
N-[4-(2-아미노페닐)-6-클로로퀴나졸린-2-일]-N'-메틸구아니딘
화학식 I5
N-[6-클로로-4-(4-메틸-2-니트로페닐)퀴나졸린-2-일]-N'-메틸구아니딘
화학식 I6
N-[4-(2-아미노-4-메틸페닐)-6-클로로퀴나졸린-2-일]-N'-메틸구아니딘
화학식 I7
N-[6-클로로-4-(2-니트로페닐)퀴나졸린-2-일]구아니딘
화학식 I8
N-[4-(2-아미노페닐)-6-클로로퀴나졸린-2-일]구아니딘
화학식 I9
N-[6-클로로-4-(4-메틸-2-니트로페닐)퀴나졸린-2-일]구아니딘
화학식 I10
N-[4-(2-아미노-4-메틸페닐)-6-클로로퀴나졸린-2-일]구아니딘.
화학식 I1 내지 I10의 화합물의 하이드로클로라이드 및 p-톨루엔술포네이트가 매우 특히 바람직하다.
화학식 Ⅰ의 화합물 및 또한 이의 제조를 위한 출발물질은, 문헌(예를 들어, Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie [Methods of Organic Chemistry], Georg-Tieme Verlag, Stuttgart와 같은 표준 작업서)에 기재된 바와 같이 그 자체로 공지된 방법에 의해, 상기 반응에 공지되고 적합한 반응 조건하에서 정확하게 제조된다. 또한 그 자체로 공지되었으나 본 명세서에 언급되지 않은 변형법을 사용할 수도 있다.
바람직하다면, 상기 출발물질은 그것이 반응 혼합물로부터 분리되지 않고 대신 화학식 Ⅰ의 화합물로 즉시 전환되도록 그 자리에서 형성될 수도 있다.
하기의 화학식 Ⅱ의 o-아미노페닐 케톤 o-아미노나프틸 케톤:
화학식 Ⅱ
(상기 식에서, R 1, R 2 및 Ar은 특허청구범위 제 1항에서 정의한 바와 같다)
을 1-시아노구아니딘 또는 Y가 상기한 바와 같은 화학식 NC-Y의 대응하는 N-알킬화 또는 N-아릴화된 1-시아노구아니딘과 반응시켜 화학식 I의 2-구아니디노-4-아릴퀴나졸린을 제조하는 것이 바람직하다.
상기 반응은 불활성 용매 중에서 수행될 수 있다.
적합한 불활성 용매의 예로는, 헥산, 석유 에테르, 벤젠, 톨루엔 또는 자일렌과 같은 탄화수소; 트리클로로에틸렌, 1,2-디클로로에탄, 테트라클로로메탄, 클로로포름 또는 디클로로메탄과 같은 염화 탄화수소; 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, n-프로판올, n-부탄올 또는 3차-부탄올과 같은 알콜; 디에틸 에테르, 디이소프로필 에테르, 테트라하이드로퓨란(THF) 또는 디옥산과 같은 에테르; 에틸렌 글리콜 모노메틸 또는 모노에틸 에테르, 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르(디글림)와 같은 글리콜 에테르; 아세톤 또는 부탄온과 같은 케톤; 아세트아미드, 디메틸아세트아미드, N-메틸피롤리돈(NMP) 또는 디메틸포름아미드(DMF)와 같은 아미드; 아세토니트릴과 같은 니트릴; 디메틸 술폭사이드(DMSO)와 같은 술폭사이드; 이황화탄소; 포름산 또는 아세트산과 같은 카르복실산; 니트로메탄 또는 니트로벤젠과 같은 니트로 화합물; 에틸 아세테이트와 같은 에스테르, 또는 상기 용매의 혼합물이 있다.
DMF, 물 또는 알콜을 사용하는 것이 바람직하다.
용매 없이, 즉 용융 상태로, 100 내지 200℃의 온도에서 반응을 수행하는 것이 매우 특히 바람직하다.
AlCl 3, TiCl 4, p-톨루엔술폰산, BF 3, 아세트산, 황산, 옥살산, POCl 3 또는 오산화인(Ⅲ)과 같은 산성 촉매가 존재하는 것이 유리하다.
반응물 중 하나를 예를 들어, 하이드로클로라이드와 같이 이미 염으로 사용하는 것은 바람직한 변형법에 포함된다.
화학식 I의 화합물의 또다른 유용한 제조 방법에는, 화학식 NC-Y의 화합물 대신, 화학식 Ⅲ의 화합물:
화학식 Ⅲ
HN=CX-Y
(상기 식에서, X는 -S-알킬, -S-아릴, O-알킬 또는 O-아릴이고, 알킬은 A에 대해 상기 정의한 바와 같은 것이 바람직하고, 아릴은 Ar에 대해 상기 정의한 바와 같은 것이 바람직하다)
을 화학식 Ⅱ의 화합물과 반응시키는 것이 포함된다.
결국, 화학식 Ⅳ의 2-클로로-4-아릴퀴나졸린:
화학식 Ⅳ
(상기 식에서, Ar, R 1 및 R 2는 상기 정의한 바와 같다)
을 Y가 상기 정의한 바와 같은 화학식 HY의 화합물과 반응시켜 화학식 I의 화합물을 제조할 수 있다. HY가 구아니딘인 것이 특히 바람직하다.
예를 들어, 에탄올과 같은 불활성 용매 중에서 등량의 산과 염기를 반응시킨 후 증발시킴으로써, 산을 사용하여 화학식 I의 염기를 관련 산-부가염으로 전환시킬 수 있다. 이 반응에 적합한 산은 특히, 생리학적으로 허용가능한 산을 생성하는 산이다. 따라서, 예를 들어, 황산, 질산, 염산 또는 브롬산과 같은 할로겐화수소산, 오르소인산과 같은 인산, 또는 술팜산과 같은 무기산, 또한 유기산, 특히, 지방족, 지환족, 방향성지방족, 방향족 또는 헤테로사이클릭 모노염기 또는 폴리염기 카르복실산, 술폰산 또는 황산, 예를 들어, 포름산, 아세트산, 프로피온산, 피발산, 디에틸아세트산, 말론산, 숙신산, 피멜산, 푸마르산, 말레산, 락트산, 타르타르산, 말산, 시트르산, 글루콘산, 아스코르브산, 니코틴산, 이소니코틴산, 메탄- 또는 에탄술폰산, 에탄술폰산, 2-하이드록시에탄술폰산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산, 나프탈렌모노- 및 -디술폰산, 및 라우릴황산을 사용할 수 있다. 예를 들어, 피크레이트와 같이 생리학적으로 허용가능하지 않은 산과의 염을 화학식 Ⅰ의 화합물의 분리 및/또는 정제에 사용할 수 있다.
본 발명은 또한 특히, 비화학적 방법으로 약제학적 제제를 제조하기 위한, NHE-3 저해제로서 화학식 I의 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염의 용도에 관한 것이다. 이 경우, 이들은 하나 이상의 고체, 액체 및/또는 반액체 부형제 또는 보조제와 함께, 및 바람직하다면, 하나 이상의 다른 활성 성분과 함께 적합한 투여 형태로 전환될 수 있다.
본 발명은 또한 화학식 I의 하나 이상의 NHE-3 저해제 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염과 용매화물 중 하나 이상을 포함하여 이루어지는 약제학적 제제에 관한 것이다.
이러한 제제는 인간 또는 동물의 의약에서 약제로 사용될 수 있다. 적합한 부형제는 장내(예를 들어, 경구적), 비경구 또는 국소 투여에 적합하며 예를 들어, 물, 식물성 오일, 벤질 알콜, 알킬렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세롤 트리아세테이트, 젤라틴, 락토오스 또는 전분과 같은 탄수화물, 마그네슘 스테아레이트, 탈크 또는 바셀린과 같이 신규 화합물과 반응하지 않는 유기 또는 무기 물질이다. 특히, 정제, 환제, 제피정, 캅셀제, 산제, 과립제, 시럽제, 주스제 또는 드롭제가 경구 투여에 적합하고, 좌제가 직장 투여에 적합하며, 용액, 바람직하게는 오일계 용액 또는 수용액, 또한 현탁액, 에멀젼 또는 임플란트가 비경구 투여에 적합하고, 연고제, 크림제 또는 산제, 또는 경피적 패치가 국소 투여에 적합하다.
또한 신규 화합물은 동결건조될 수 있으며 생성된 동결건조물은 예를 들어, 주사제의 제조에 사용될 수 있다. 상기 제제는 멸균처리되고 및/또는 윤활제, 방부제, 멸균제 및/또는 습윤제, 에멀젼화제, 삼투압 조절용 염, 완충 물질, 착색제, 향미제 및/또는 예를 들어 하나 이상의 비타민과 같은 다수의 다른 활성 물질과 같은 보조제를 포함할 수 있다.
에어로졸 또는 스프레이 형태로 투여하기에 적합한 약제학적 제제는, 예를 들어, 약제학적으로 허용가능한 용매 중의 화학식 I의 화합물의 활성 성분의 용액, 현탁액 또는 에멀젼이다.
화학식 I의 화합물 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염과 용매화물은 상기한 질병 또는 질병 상태의 치료 및/또는 예방에 사용될 수 있다.
일반적으로, 본 발명에 따른 물질은 투여 단위 당 약 0.1 내지 500 mg, 특히 1 내지 10 mg의 투여량으로 투여하는 것이 바람직하다. 일일 투여량은 체중 1 kg 당 약 0.001 내지 10 mg이 바람직하다. 그러나, 각 환자에 대한 특정 투여량은 예를 들어, 사용한 특정 화합물의 효험, 환자의 나이, 체중, 일반적인 건강 상태, 성별, 식이, 투여 시간 및 방법, 배설량, 약제 조합 및 치료법이 적용되는 특정 질환의 정도에 따라 결정된다. 경구 투여가 바람직하다.
실 시 예
실시예 1:
2-아미노-5-클로로-2'-니트로벤조페논 1.00 g, 1-시아노구아니딘 0.60 g, p-톨루엔술폰산 모노하이드레이트 2.00 g을 150℃에서 2시간 동안 용융시켰다. 냉각된 용융물에 메탄올을 첨가하고, 상기 혼합물을 65℃에서 30분 동안 교반하였다. 여과 후 얻어진 잔사를 폐기하고, 여과물에 물을 첨가하였다. 이어서 용액을 알칼리성이 되게 하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 추출물을 증발시키고 아세토니트릴로부터 결정화하여, 유리 염기 N-[6-클로로-4-(2-니트로페닐)퀴나졸린-2-일]구아니딘을 생성하였다.
산-부가염을 형성하기 위해, 메탄올 중에 염기를 용해시키고, HCl-함유 이소프로판올을 사용하여 혼합물을 산성화시키고, 이어서 용매를 제거하였다. 아세토니트릴로부터 N-[6-클로로-4-(2-니트로페닐)퀴나졸린-2-일]구아니디늄 클로라이드 결정을 얻었다.
실시예 2:
N-(5-메톡시-4-페닐퀴나졸린-2-일)구아니디늄 클로라이드 1.20 g을 피리디늄 클로라이드 8.00 g과 함께 170℃에서 6시간 동안 교반하였다. 이어서 냉각시킨 용융물을 Na 2S 2O 4 용액 20 ㎖로 처리하였다. 생성된 침전물을 분리하고 메탄올 중에 용해시키고, HCl-함유 이소프로판올을 사용하여 용액을 산성화하였다. 용매를 제거한 후, 아세토니트릴로부터 잔사를 결정화하여, N-(5-하이드록시-4-페닐퀴나졸린-2-일)구아니디늄 클로라이드(m.p. 310℃)를 생성하였다.
실시예 3:
2-아미노-5-클로로벤조페논 3.01 g, N-시아노-N'-메틸구아니딘 2.55 g 및 p-톨루엔술폰산 모노하이드레이트 7.42 g을 용융물 내에서 150 내지 160℃에서 2시간 동안 교반하였다. 냉각시킨 용물물에 메탄올을 첨가하고, 상기 혼합물을 65℃에서 30분 동안 교반하였다. 여과 후 얻어진 잔사를 폐기하고, 물과 에틸 아세테이트를 여과물에 첨가하고, 상기 혼합물을 다시 65℃에서 30분 동안 교반한다. 이어서 생성물을 얼음조에서 교반하면서 결정화시켜, N-(6-클로로-4-페닐퀴나졸린-2-일)-N'-메틸구아니디늄 p-톨루엔술포네이트(m.p. 268-269℃)를 생성하였다.
실시예 4:
N-[6-클로로-4-(2-니트로페닐)퀴나졸린-2-일]구아니디늄 p-톨루엔술포네이트 300 mg을 메탄올 50 ㎖ 중에 용해시키고, 라니 니켈 300 mg의 존재 하에서 대기압에서 21시간의 과정을 거쳐 실온에서 수소화한다. 여과하고 용매를 제거하여 여과물로부터 N-[6-클로로-4-(2-아미노페닐)퀴나졸린-2-일]구아니디늄 p-톨루엔술포네이트(m.p. 250℃)를 생성하였다.
실시예 5:
아세트산 5 ㎖ 중의 N-(6-메틸술파닐-4-페닐퀴나졸린-2-일)구아니디늄 클로라이드 0.350 g 및 과붕산나트륨 트리하이드레이트 0.140 g의 혼합물을 80℃에서 30분 동안 교반하였다. 이어서 용액을 증발시키고 물을 첨가하였다. 수용액의 pH를 12로 조절하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 추출물을 증발시켜 결정 형태로 N-(6-메탄술피닐-4-페닐퀴나졸린-2-일)구아니딘(m.p. 175-180℃)을 생성하였다.
실시예 6:
아세트산 5 ㎖ 중의 N-(6-메틸술파닐-4-페닐퀴나졸린-2-일)구아니디늄 클로라이드 1.200 g 및 과붕산나트륨 트리하이드레이트 0.154 g의 혼합물을 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서 상기 반응 혼합물을 증발시키고, 물을 첨가하였다. 생성된 용액의 pH를 12로 조절하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 추출물을 증발시켜 결정 형태로 N-(6-메탄술포닐-4-페닐퀴나졸린-2-일)구아니딘(m.p. 180-185℃)을 생성하였다.
산-부가염을 형성하기 위해, N-(6-메탄술포닐-4-페닐퀴나졸린-2-일)구아니딘 0.80 g을 1N HCl 수용액으로 처리하고, 생성된 결정을 에탄올로부터 재결정화하였다.
실시예 7:
2-아미노-5-클로로벤조페논의 하이드로클로라이드 2.70 g 및 N-시아노-N',N"-디메틸구아니딘 1.70 g을 혼합하고 150℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 메탄올 중에서 회수하고 여과하였다. 여과물을 증발시켰다. 이소프로판올과 디에틸 에테르의 혼합물로부터 잔사를 재결정화하여, N-(6-클로로-4-페닐퀴나졸린-2-일)-N',N"-디메틸구아니디늄 클로라이드(m.p. 264-267℃)를 생성하였다.
실시예 8:
2-아미노-5-클로로-2'-니트로벤조페논 500 mg, N-시아노-N'-에틸구아니딘 406 mg 및 p-톨루엔술폰산 모노하이드레이트 1.03 g을 용융물 중에서 150 내지 160℃에서 2시간 동안 교반하고 실시예 3에서와 같이 반응마무리를 하여, N-[6-클로로-4-(2-니트로페닐)퀴나졸린-2-일]-N'-에틸구아니디늄 p-톨루엔술포네이트(m.p. 298-300℃)를 생성하였다.
실시예 9:
2-아미노-5-클로로-2'-니트로벤조페논 500 mg, N-시아노-N-페닐구아니딘 580 mg 및 p-톨루엔술폰산 모노하이드레이트 1.03 g의 혼합물을 용융물 중에서 150 내지 160℃에서 2시간 동안 교반하고 실시예 3에서와 같이 반응마무리를 하여, N-[6-클로로-4-(2-니트로페닐)퀴나졸린-2-일]-N'-페닐구아니디늄 p-톨루엔술포네이트(m.p. 261-263℃)를 생성하였다.
대응하는 전구물질을 사용하여, 상기 과정과 유사한 방법으로, NHE-3 저해제로서 바람직한 하기의 산-부가염을 얻었다:
pTsOH는 p-톨루엔술폰산을 나타낸다.
실시예 10-101:
실시예 102-154:
실시예 155-205:
실시예 206-292:
실시예 293-379:
실시예 380-465:
실시예 466-552:
실시예 553-639:
실시예 640-726:
실시예 727-813:
실시예 814-900:
실시예 901-961:
약리학적 시험
NHE-3 저해제로서 화학식 I의 화합물의 특성화에 사용되는 방법을 하기에 기재한다.
화학식 I의 화합물은 NHE-1 내지 NHE-3 동질이성체에 대한 선택성에 관해 특성화되었다. 세가지 동질이성체는 마우스 섬유아세포 세포주에서 안정한 형태로 발현되었다. 세포내 아시도시스 후에 22Na +의 세포 속으로의 EIPA-민감성 흡수를 측정함으로써 이 화합물의 저해 작용을 평가하였다.
재료 및 방법
다른 NHE 동질이성체를 발현하는 lAP1 세포주
NHE-1, -2 및 -3 동질이성체를 발현하는 lAP1 세포주(마우스 섬유아세포 세포주)를 Prof. J. Pouyssegur(Nice, France)로부터 입수하였다. 문헌[Franchi et al. (1986)]의 방법으로 트랜스펙션을 실시하였다. 10%의 불활성화된 우태아 혈청(FCS)을 포함하는 둘베코스 변형 이글 배지(Dulbeccos modified eagle medium)(DMEM)에서 세포를 배양하였다. NHE-발현 세포를 선별하기 위하여, 문헌[Sardet et al. (1989)]의 소위 "산 사멸 법(acid killing method)"을 사용하였다. 이 세포를 우선 NH 4Cl-함유 무중탄산염 및 무나트륨 완충액에서 30분간 배양하였다. 이어서 무중탄산염, 무 NH 4Cl 및 무나트륨 완충액으로 세척하여 세포외 NH 4Cl를 제거하였다. 그리고나서, 이 세포를 무중탄산염 NaCl-함유 완충액에서 배양하였다. 실시된 세포내 산성화에서, NHE를 기능적으로 발현하는 세포들만 생존할 수 있었다.
동질이성체 선택성에 대한 NHE 저해제의 특징 설명
NHE-1, NHE-2 및 NHE-3 동질이성체를 발현하는 상기 마우스 섬유아세포 세포주를 사용하여, 문헌[Counillon et al. (1993) 및 Scholz et al.(1995)]에 기재된 방법으로 동질이성체에 대한 화합물의 선택성을 시험하였다. NH 4Cl 프레펄스(prepulse)법 및 연이은 무중탄산염 22Na + -함유 완충액 중에서의 배양을 통해, 이 세포를 세포내 산성화하였다. 세포내 산성화로 NHE가 활성화되었고, 세포 내에 나트륨이 흡수되었다. 시험 화합물의 효과는 EIPA(에틸이소프로필아밀로라이드)-민감성 22Na + 흡수 저해로서 나타났다.
NHE-1, NHE-2 및 NHE-3 를 발현한 세포를 24-웰 미량역가 플레이트에 5-7.5x10 4 세포/웰의 밀도로 넣고, 24 내지 48 시간동안 배양기 바닥 전체가 한층의 세포로 덮이도록 배양하였다. 이 배지를 흡인하여 제거하고, 세포를 NH 4Cl 완충액(50mM NH 4Cl, 70mM 콜린 클로라이드, 15mM MOPS, pH 7.0) 중에 60분 동안 37℃로 배양하였다. 이어서, 완충액을 제거하고, 세포를 콜린 클로라이드 세척 완충액(120mM 콜린 클로라이드, 15mM PIPES/트리스, 0.1mM 우아바인, 1mM MgCl 2, 2mM CaCl 2, pH 7.4)으로 신속하게 두번 도포한 후 이 완충액에서 6분간 배양하였다. 배양시간이 끝난 후, 배양 완충액을 흡인하여 제거하였다. 세포외 방사능을 제거하기 위하여, 세포를 얼음-냉각 인산염-완충된 염액(PBS)으로 네 번 신속하게 세척하였다. 이어서, 웰당 0.3ml의 0.1N NaOH를 첨가하여 이 세포를 용해시켰다. 세포 단편-함유 용액을 신틸레이션 튜브에 옮겼다. 이어서, 각 웰을 0.3ml의 0.1N NaOH로 두번 세척하였고, 유사하게 세척 용액을 대응하는 신틸레이션 튜브에 도입하였다. 세포 용해물을 함유하는 튜브에 신틸레이션 칵테일을 첨가하고, β-방사선을 측정하여 세포 내에 흡수된 방사능을 확인하였다.
문헌:
Counillon et al.(1993) Mol. Pharmacol. 44: 1041-1045
Franchi et al. (1986) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83: 9388-9392
Morgan and Canessa (1990) J. Membrane Biol. 118, 193-214
Sardet et al. (1989) Cell 56: 271-280
Scholz et al. (1995) Cardivasc. Res. 29: 260-268

하기 실시예는 약제학적 제제에 관한 것이다.
실시예 A: 주사용 바이알
화학식 I의 NHE-3 저해제 100g과 제2인산나트륨 5g을 이차증류수 3l중에 용해시킨 용액을 2N의 염산을 사용하여 pH 6.5로 조절하고, 멸균여과하여 주사용 바이알에 충전하고, 멸균 조건 하에서 동결건조하고, 멸균 조건 하에서 밀봉한다. 각 주사용 바이알은 활성 성분 5mg을 함유한다.
실시예 B: 좌제
화학식 I의 NHE-3 저해제 20g의 혼합물을 대두 레시틴 100g과 코코아 버터 1400g과 함께 용융시키고, 혼합물을 몰드에 붓고 냉각시킨다. 각 좌제는 활성 성분 20mg을 함유한다.
실시예 C: 용액제
화학식 I의 NHE-3 저해제 1g, NaH 2PO 4·2H 2O 9.38g, Na 2HPO 4·12H 2O 28.48g 및 벤즈알코늄 클로라이드 0.1g을 이차 증류수 940㎖ 중에 용해시켜 용액제를 제조한다. 이 용액제를 pH 6.8로 조절하고, 1l로 맞춘후, 방사선에 의해 멸균처리한다. 이 용액제는 점안제 형태로 사용할 수 있다.
실시예 D: 연고제
화학식 I의 NHE-3 저해제 500mg을 무균조건하에서 바셀린 99.5g과 혼합한다.
실시예 E: 정제
화학식 I의 NHE-3 저해제 1kg, 락토오스 4kg, 감자전분 1.2kg, 탈크 0.2kg과 마그네슘 스테아레이트 0.1kg의 혼합물을 통상적 방법으로 압착하여, 각 정제가 활성 성분 10mg을 함유하는 정제를 제조한다.
실시예 F: 제피정
실시예 E와 유사하게, 정제를 압착하고, 이어서 수크로오스, 감자전분, 탈크, 트라가칸트와 염료로 이루어진 제피를 사용하여 통상의 방법으로 제피하여 제피정을 제조한다.
실시예 G: 캅셀제
화학식 I의 NHE-3 저해제 2kg을, 각 캅셀이 활성 성분 20mg을 함유하도록 통상의 방법으로 경질 젤라틴 캅셀에 충전한다.
실시예 H: 앰플
화학식 I의 NHE-3 저해제 1kg을 이차증류수 60ℓ 중에 용해시킨 용액을 멸균여과하여 앰플에 충전하고, 멸균 조건 하에서 동결건조하고, 멸균 조건 하에서 밀봉한다. 각 앰플은 활성 성분 10mg을 함유한다.