WIPO logo
Mobile | Deutsch | Español | Français | 日本語 | 한국어 | Português | Русский | 中文 | العربية |
PATENTSCOPE

Search International and National Patent Collections
World Intellectual Property Organization
Search
 
Browse
 
Translate
 
Options
 
News
 
Login
 
Help
 
maximize
Machine translation
1. (WO2017107972) NOVEL CRYSTALLINE FORM OF SELECTIVE S1P1 RECEPTOR AGONIST AND METHOD FOR PREPARING SAME

说明书

发明名称 0001   0002   0003   0004   0005   0006   0007   0008   0009   0010   0011   0012   0013   0014   0015   0016   0017   0018   0019   0020   0021   0022   0023   0024   0025   0026   0027   0028   0029   0030   0031   0032   0033   0034   0035   0036   0037   0038   0039   0040   0041   0042   0043   0044   0045   0046   0047   0048   0049   0050   0051   0052   0053   0054   0055   0056   0057   0058   0059   0060   0061   0062   0063   0064   0065   0066   0067   0068   0069   0070   0071   0072   0073   0074   0075   0076   0077   0078   0079   0080   0081   0082   0083   0084   0085   0086   0087   0088   0089   0090   0091   0092   0093   0094   0095   0096   0097   0098   0099   0100   0101   0102   0103   0104   0105   0106   0107   0108   0109   0110   0111   0112   0113  

权利要求书

1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17   18   19  

附图

0001   0002   0003   0004   0005   0006   0007   0008   0009   0010  

说明书

发明名称 : 一种选择性S1P1受体激动剂的新晶型及其制备方法

技术领域

[0001]
本发明涉及化学医药领域,特别是涉及一种S1P1受体选择性激动剂Ponesimod的新晶型及其制备方法。

背景技术

[0002]
已知晶型是影响药品质量的重要因素。同一药物的不同晶型在外观、溶解度、熔点、溶出度、生物有效性等方面可能会有显著不同,也会对药物的稳定性、生物利用度及疗效产生不同的影响。因此,研发新的更适合应用的晶型对于药物开发具有非常重要的意义。
[0003]
Ponesimod(式I所示化合物)是由Actelion公司开发的一种选择性S1P1受体激动剂(selective S1P1receptor modulator)。该药物用于治疗中度到重度慢性斑块状银屑病的2期中期试验获得成功,并将开展治疗银屑病的3期临床试验研究。
[0004]
[0005]
目前,专利CN100567275C实例85公开了式I化合物的制备方法,专利CN102177144B中披露该方法制备得到的为非晶形式,另专利CN102177144B中新公开了式I化合物的晶形A、晶形C、晶形III、晶型II。研究表明,晶形III结晶度较差,且在室温条件下会转化为晶形II;晶形II难以重复制备且包 含有一定量的丙酸;晶形A热力学稳定性劣于晶形C,相对而言,晶形C为适合用于药物开发的晶型,但是晶形C的溶解性不太理想。
[0006]
发明内容
[0007]
本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足提供一种比已有晶形C性质更优的Ponesimod新晶型,命名为Ponesimod晶型1、Ponesimod晶型2、Ponesimod晶型3。
[0008]
本发明同时还提供所述Ponesimod晶型1、Ponesimod晶型2、Ponesimod晶型3的制备方法和用途。
[0009]
本发明提供的Ponesimod晶型1,其X射线粉末衍射图在2theta值为18.1°±0.2°、14.6°±0.2°、11.3°±0.2°处具有特征峰。
[0010]
进一步地,Ponesimod晶型1的X射线粉末衍射图还在2theta值为10.8°±0.2°、16.3°±0.2°、22.7°±0.2°中的一处或多处具有衍射峰。优选地,晶型1的X射线粉末衍射图在2theta值为10.8°±0.2°、16.3°±0.2°、22.7°±0.2°处均具有衍射峰。
[0011]
更进一步的,Ponesimod晶型1的X射线粉末衍射图还在2theta值为26.0°±0.2°、6.8°±0.2°、13.1°±0.2°中的一处或多处具有衍射峰。优选地,晶型1的X射线粉末衍射图还在2theta值为26.0°±0.2°、6.8°±0.2°、13.1°±0.2°处均具有衍射峰。
[0012]
根据本发明的一个具体且优选方面,晶型1的X射线粉末衍射图如图1所示。
[0013]
优选地,本发明提供的Ponesimod晶型1,加热至78℃附近开始出现吸热峰,其差示扫描量热分析图基本如图2所示。
[0014]
优选地,本发明提供的Ponesimod晶型1,加热至100℃时,具有约7.1%的重量损失梯度,其热重分析图基本如图3所示。
[0015]
Ponesimod晶型1通过如下方法制备得到:使Ponesimod溶于环醚类溶剂形成溶液,向溶液中加入烷烃类溶剂,析出固体得到Ponesimod晶型1。
[0016]
进一步地,所述环醚类溶剂包括但不限于四氢呋喃、1,4-二氧六环等的一种或多种混合,其中以1,4-二氧六环为优选;所述的烷烃类溶剂包括但不限于正己烷、正庚烷等的一种或多种混合,其中以正庚烷为优选。
[0017]
本发明提供的Ponesimod晶型2,其X射线粉末衍射图在2theta值为3.8°±0.2°、10.8°±0.2°、6.1°±0.2°处具有特征峰。
[0018]
进一步地,Ponesimod晶型2的X射线粉末衍射图还在2theta值为5.4°±0.2°、10.2°±0.2°、7.0°±0.2°中的一处或多处具有衍射峰。优选地,晶型2的X射线粉末衍射图在2theta值为5.4°±0.2°、10.2°±0.2°、7.0°±0.2°处均具有衍射峰。
[0019]
更进一步的,Ponesimod晶型2的X射线粉末衍射图还在2theta值为13.7°±0.2°、7.6°±0.2°、11.4°±0.2°中的一处或多处具有衍射峰。优选地,晶型1的X射线粉末衍射图在2theta值为13.7°±0.2°、7.6°±0.2°、11.4°±0.2°处均具有衍射峰。
[0020]
根据本发明的一个具体且优选方面,Ponesimod晶型2的X射线粉末衍射图如图4所示。
[0021]
优选地,本发明提供的Ponesimod晶型2,加热至88℃附近开始出现吸热峰,其差示扫描量热分析图基本如图5所示。
[0022]
优选地,本发明提供的Ponesimod晶型2,加热至80℃时,具有约1.4% 的重量损失梯度,其热重分析图基本如图6所示。
[0023]
Ponesimod晶型2通过如下方法制备得到:使Ponesimod与酯类溶剂混合,在温度0~50℃下悬浮搅拌,分离固体得到Ponesimod晶型2。
[0024]
进一步地,所述酯类溶剂包括但不限于乙酸异丙酯、乙酸乙酯等的一种或多种混合,其中以乙酸异丙酯、乙酸乙酯为优选。
[0025]
优选地,制备Ponesimod晶型2时,在室温下进行悬浮搅拌。
[0026]
本发明提供的Ponesimod晶型3,其X射线粉末衍射图在2theta值为12.2°±0.2°、6.2°±0.2°、5.6°±0.2°处具有特征峰。
[0027]
进一步地,Ponesimod晶型3的X射线粉末衍射图还在2theta值为10.8°±0.2°、13.4°±0.2°、11.2°±0.2°中的一处或多处具有衍射峰。优选地,Ponesimod晶型3的X射线粉末衍射图在2theta值为10.8°±0.2°、13.4°±0.2°、11.2°±0.2°处均具有衍射峰。
[0028]
更进一步的,Ponesimod晶型3的X射线粉末衍射图还在2theta值为10.2°±0.2°、16.3°±0.2°、20.5°±0.2°中的一处或多处具有衍射峰。优选地,晶型3的X射线粉末衍射图在2theta值为10.2°±0.2°、16.3°±0.2°、20.5°±0.2°处均具有衍射峰。
[0029]
根据本发明的一个具体且优选方面,Ponesimod晶型3的X射线粉末衍射图如图7所示。
[0030]
优选地,本发明提供的Ponesimod晶型3,加热至85℃附近开始出现吸热峰,其差示扫描量热分析图基本如图8所示。
[0031]
Ponesimod晶型3可通过如下方法中的任一种制备得到:
[0032]
1)使Ponesimod与酯类溶剂混合,加热至固体溶清,降温至固体析出, 分离固体得到Ponesimod晶型3,其中酯类溶剂包括但不限于乙酸异丙酯、乙酸乙酯等,其中以乙酸异丙酯、乙酸乙酯为优选;其中加热优选加热至40~80℃,更优选加热至约50℃~80℃,最优选50℃~60℃。所述降温优选降温至-5~5℃,更优选约4℃;
[0033]
2)使Ponesimod与醚类溶剂混合,在温度40~60℃下悬浮搅拌,分离固体得到Ponesimod晶型3,其中醚类溶剂包括但不限于甲基叔丁基醚。
[0034]
本发明的Ponesimod晶型1、晶型2、晶型3或其任意比例混合可以作为选择性S1P1受体激动剂,用于制备治疗银屑病的药物。
[0035]
本发明还涉及一种药物组合物,其包含本发明所述的Ponesimod晶型1、晶型2、晶型3或其任意比例混合。进一步地,该药物组合物可用于治疗银屑病,包括但不限于治疗中度到重度慢性斑块状银屑病等。
[0036]
由于以上技术方案的实施,本发明与现有技术相比具有如下优点:
[0037]
本发明意外发现了Ponesimod的晶型1、晶型2、晶型3,与现有晶形C相比,这些晶型不仅具有较好的稳定性,而且溶解性有显著提高,为含Ponesimod化合物的药物制剂的制备提供了新的更好的选择,对于药物开发具有非常重要的意义。

附图说明

[0038]
图1为Ponesimod晶型1的XRPD图;
[0039]
图2为Ponesimod晶型1的DSC图;
[0040]
图3为Ponesimod晶型1的TGA图;
[0041]
图4为Ponesimod晶型2的XRPD图;
[0042]
图5为Ponesimod晶型2的DSC图;
[0043]
图6为Ponesimod晶型2的TGA图;
[0044]
图7为Ponesimod晶型3的XRPD图;
[0045]
图8为Ponesimod晶型3的DSC图;
[0046]
图9为Ponesimod晶型2放置前后的XRPD叠图(A为放置前,B为在25℃,RH60%相对湿度下放置6个月,C为在40℃,RH75%相对湿度条件下放置6个月,D为在80℃的环境中放置3月);
[0047]
图10为Ponesimod晶型3放置前后的XRPD叠图(A为放置前,B为在25℃,RH60%相对湿度下放置6个月,C为在40℃,RH75%相对湿度条件下放置6个月)。

具体实施方式

[0048]
以下结合具体的实施例对本发明做进一步详细的说明,但本发明不限于以下实施例。实施例中未注明的条件为常规条件。制备方法中作为原料的Ponesimod为固体无定型形式,通过已知方法制备得到,例如CN100567275C、CN102177144B中公开的方法。
[0049]
下述实施例中,所述的试验方法通常按照常规条件或制造厂商建议的条件实施。
[0050]
本发明中所用到的缩写的解释如下:
[0051]
XRPD:X射线粉末衍射;DSC:差示扫描量热分析;TGA:热重分析。
[0052]
本发明所述的X射线粉末衍射图在Panalytical Empyrean X射线粉末衍射仪上采集。本发明所述的X射线粉末衍射的方法参数如下:
[0053]
X射线反射参数:Cu,Kα
[0054]
1.540598;1.544426
[0055]
Kα2/Kα1强度比例:0.50
[0056]
电压:45仟伏特(kV);电流:40毫安培(mA);扫描范围:自3.0至40.0度。
[0057]
本发明所述的差示扫描量热分析(DSC)图在TA Q2000上采集,方法参数如下:扫描速率:10℃/min;保护气体:氮气。
[0058]
本发明所述的热重分析(TGA)图在TA Q5000上采集。本发明所述的热重分析(TGA)的方法参数如下:扫描速率:10℃/min;保护气体:氮气。
[0059]
实施例1
[0060]
Ponesimod晶型1的制备方法:
[0061]
将48.1mg Ponesimod加入0.40mL 1,4-二氧六环中,并过滤得到滤液,在室温搅拌的条件下逐滴添加正庚烷1.20mL,至析出晶体并悬浮搅拌过夜,离心滤掉上清液,得到Ponesimod晶型1。
[0062]
本实施例得到的晶型1的X射线粉末衍射数据包括但表1所示的峰值。其XRPD图如图1,其DSC图如图2,其TGA图如图3。
[0063]
表1
[0064]
[表0001]
2thetad间隔强度%
3.9022.633.82
4.3320.384.11
6.8312.9519.68
9.259.568.92
10.838.1733.57
11.337.8148.18
13.076.7818.63
14.556.0950.30
16.285.4430.46

[0065]
[表0002]
16.955.2312.05
17.695.0133.34
18.104.90100.00
18.624.7621.41
19.544.5413.20
20.024.4420.89
20.894.2515.98
21.394.1515.31
22.373.9715.94
22.743.9126.48
23.563.7827.53
24.203.6815.26
24.863.5810.25
25.043.569.56
25.963.4321.58
26.243.4018.40
27.363.2613.49
28.063.185.96
28.613.127.59
29.163.069.02
30.162.964.41
31.362.853.55
32.262.789.03
35.322.542.65

[0066]
实施例2
[0067]
Ponesimod晶型2的制备方法:
[0068]
将399.9mg的Ponesimod加入到4.0mL乙酸乙酯中,于室温条件下搅拌24小时,通过离心滤掉上清液,在室温下真空干燥3小时得到固体,为晶型2。
[0069]
本实施例得到的晶型2的X射线粉末衍射数据包括表2所示的峰值。其XRPD图如图4,其DSC图如图5,其TGA图如图6。
[0070]
表2
[0071]
[表0003]
2thetad间隔强度%
3.8323.05100.00
5.3916.4057.99
6.1314.4261.47
7.0112.6151.80
7.6111.6231.18
8.7010.1718.02
9.139.6816.66
9.609.2216.67
10.198.6855.67
10.768.2268.96
11.427.7530.04
12.047.3520.31
12.337.1816.82
12.946.8421.97
13.696.4750.85
14.646.0519.98
15.235.823.84
17.045.2019.88
18.814.7221.25
20.524.3310.78
22.234.0021.07
23.883.7313.89
24.263.6714.97
25.863.459.12

[0072]
[表0004]
29.932.991.31

[0073]
实施例3
[0074]
Ponesimod晶型3的制备方法:
[0075]
将106.8mg的Ponesimod加入到2.0mL甲基叔丁基醚中,于50℃条件下搅拌24小时,离心滤掉上清液,在室温下真空干燥3小时得到固体,为晶型3。
[0076]
本实施例得到的晶型3的X射线粉末衍射数据包括表3所示的峰值。其XRPD图如图7,其DSC图如图8。
[0077]
表3
[0078]
[表0005]
2thetad间隔强度%
3.0429.0644.85
4.1121.4748.04
5.5715.8668.31
6.2214.21100.00
6.8013.0035.35
7.1212.4234.38
8.2410.7322.06
8.6310.2527.59
9.379.4423.09
9.779.0529.19
10.198.6846.52
10.848.1665.59
11.207.9048.96
11.727.5519.84
12.227.2488.65
12.816.9118.81
13.426.6055.47
13.656.4934.77

[0079]
[表0006]
14.286.2010.23
14.905.9510.64
16.285.4541.52
17.495.079.70
18.884.7021.65
19.114.6426.78
19.494.5512.97
20.464.3430.74
21.174.2010.12
21.894.0623.63
22.623.9312.80
23.523.7810.69
24.393.6516.03
24.623.6214.56
25.133.547.78
26.193.406.51
27.263.274.75

[0080]
实施例4
[0081]
Ponesimod晶型3的制备方法:
[0082]
将149.5mg Ponesimod加入到1.2mL乙酸乙酯溶剂中,加热至50℃溶清,然后转移至4℃条件下冷却析晶,离心滤掉上清液,在室温下真空干燥3小时得到固体,为晶型3。
[0083]
本实施例得到的晶型3的X射线粉末衍射数据包括表4所示的峰值。
[0084]
表4
[0085]
[表0007]
2thetad间隔强度%
5.5116.0359.01
6.2314.19100.00

[0086]
[表0008]
6.8912.8220.88
8.6010.2828.10
9.769.0623.34
10.158.7146.48
10.828.1886.19
11.217.8966.72
12.147.2995.88
13.356.6358.84
16.305.4442.09
18.974.6824.42
20.504.3329.97
21.924.0624.79
24.433.6415.93

[0087]
实施例5
[0088]
本发明晶型2的稳定性研究:
[0089]
称取20mg的本发明制备得到的晶型2,分别在25℃,RH60%相对湿度和40℃,RH75%相对湿度条件下放置6个月,在80℃的环境中放置3月测试其稳定性。试验结果如表5所示,放置前后的XRPD叠图如图9所示。结果表明,本发明的晶型2在25℃,60%相对湿度放置6个月,在40℃,RH 75%相对湿度放置6个月和在80℃条件下放置3个月后晶型基本不变,说明本发明的晶型2具有良好的稳定性。
[0090]
表5晶型2的稳定性研究
[0091]
[0092]
[0093]
实施例6
[0094]
本发明晶型3的稳定性研究:
[0095]
称取20mg的本发明制备得到的晶型3,分别在25℃,RH60%相对湿度和40℃,RH75%相对湿度条件下放置6个月,测试其稳定性。试验结果如表6所示,放置前后的XRPD叠图如图10所示。结果表明,本发明的晶型3在25℃,RH60%相对湿度和40℃,RH 75%相对湿度下放置6个月后晶型基本不变,说明本发明的晶型3具有良好的稳定性。
[0096]
表6晶型3的稳定性研究
[0097]
[0098]
实施例7
[0099]
Ponesimod晶型2与现有晶形A和C的溶解性研究:
[0100]
将CN102177144B中的晶形A、晶形C以及本发明晶型2的样品分别用pH6.5的FaSSIF,pH 5.0的FeSSIF,pH 1.8的SGF缓冲液和水配制成饱和溶液,采用高效液相色谱(HPLC)分别测定1小时和24小时时溶液中药物的含量。本发明晶型2与现有晶形A和C的溶解度数据如表7所示。
[0101]
表7本发明晶型2与现有晶形A和C的溶解度数据
[0102]
[0103]
*ND:低于仪器的检测限度
[0104]
从表7可见,本发明的晶型2在FaSSIF,FeSSIF和SGF中的溶解度均明显高于专利CN102177144B晶形A和C,相较于专利CN102177144B晶形A和C,本发明的晶型2具有更高的生物利用度。这对于提高药物疗效和安全性、降低药载量具有重要意义。
[0105]
实施例8
[0106]
Ponesimod晶型3与现有晶形A和C的溶解性研究:
[0107]
将CN102177144B中的晶形A、晶形C以及本发明晶型3的样品分别用pH6.5的FaSSIF,pH 5.0的FeSSIF缓冲液和水配制成饱和溶液,采用高效液相色谱(HPLC)分别测定1小时和24小时时溶液中药物的含量。本发明晶型3与现有晶形A和C的溶解度数据据如表8所示。
[0108]
表8本发明晶型3与现有晶形A和C的溶解度数据
[0109]
[0110]
*ND:低于仪器的检测限度
[0111]
溶解度是药物的关键性质之一,其直接影响药物在人体内的吸收,而不同晶型药物的溶解度可能会存在明显差异,体内吸收动态也会发生变化,造成生 物利用度的差异,最终影响到药物的临床安全性和疗效。
[0112]
从表8可见,本发明的晶型3在FaSSIF和FeSSIF中的溶解度均明显高于专利CN102177144B晶形A和C,相较于专利CN102177144B晶形A和C,本发明的晶型3具有更高的生物利用度。这对于提高药物疗效和安全性、降低药载量具有重要意义。
[0113]
上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点,其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施,并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰,都应涵盖在本发明的保护范围之内。

权利要求书

[权利要求 1]
一种Ponesimod晶型2,其特征在于,其X射线粉末衍射图(CuKα辐射)在2theta值为3.8°±0.2°、10.8°±0.2°、6.1°±0.2°处具有特征峰。
[权利要求 2]
根据权利要求1所述的Ponesimod晶型2,其特征在于,其X射线粉末衍射图还在2theta值为5.4°±0.2°、10.2°±0.2°、7.0°±0.2°中的一处或多处具有衍射峰。
[权利要求 3]
根据权利要求1或2所述的Ponesimod晶型2,其特征在于,其X射线粉末衍射图还在2theta值为13.7°±0.2°、7.6°±0.2°、11.4°±0.2°中的一处或多处具有衍射峰。
[权利要求 4]
根据权利要求1所述的Ponesimod晶型2,其特征在于,其X射线粉末衍射图基本与图4一致。
[权利要求 5]
一种如权利要求1至4中任一项所述的Ponesimod晶型2的制备方法,其特征在于,所述方法包括:使Ponesimod与酯类溶剂混合,在温度0~50℃下悬浮搅拌,分离固体得到Ponesimod晶型2。
[权利要求 6]
根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述酯类溶剂为乙酸异丙酯或乙酸乙酯或二者的组合。
[权利要求 7]
一种Ponesimod晶型3,其特征在于,其X射线粉末衍射图(CuKα辐射)在2theta值为12.2°±0.2°、6.2°±0.2°、5.6°±0.2°处具有特征峰。
[权利要求 8]
根据权利要求7所述的Ponesimod晶型3,其特征在于,其X射线粉末衍射图还在2theta值为10.8°±0.2°、13.4°±0.2°、11.2°±0.2°中的一处或多处具有衍射峰。
[权利要求 9]
根据权利要求7或8所述的Ponesimod晶型3,其特征在于,其X射线粉末衍射图还在2theta值为10.2°±0.2°、16.3°±0.2°、20.5°±0.2°中的一处或多处 具有衍射峰。
[权利要求 10]
根据权利要求7所述的Ponesimod晶型3,其特征在于,其X射线粉末衍射图基本与图7一致。
[权利要求 11]
一种如权利要求7至10中任一项所述的Ponesimod晶型3的制备方法,其特征在于,所述方法包括步骤1)或2):1)使Ponesimod与酯类溶剂混合,先加热至固体溶清,然后降温至固体析出,分离固体得到Ponesimod晶型3;2)使Ponesimod与醚类溶剂混合,在温度40~60℃下悬浮搅拌,分离固体得到Ponesimod晶型3。
[权利要求 12]
根据权利要求11所述的制备方法,其特征在于,步骤1)中,所述酯类溶剂为乙酸异丙酯或乙酸乙酯或二者的组合;步骤2)中,所述醚类溶剂为甲基叔丁基醚。
[权利要求 13]
根据权利要求11所述的制备方法,其特征在于,步骤1)中,所述加热为加热至40~80℃;所述降温为降温至-5~5℃。
[权利要求 14]
一种Ponesimod晶型1,其特征在于,其X射线粉末衍射图(CuKα辐射)在2theta值为18.1°±0.2°、14.6°±0.2°、11.3°±0.2°处具有特征峰。
[权利要求 15]
根据权利要求14所述的Ponesimod晶型1,其特征在于,其X射线粉末衍射图还在2theta值为10.8°±0.2°、16.3°±0.2°、22.7°±0.2°、26.0°±0.2°、6.8°±0.2°、13.1°±0.2°中的一处或多处具有衍射峰。
[权利要求 16]
一种如权利要求14或15所述的Ponesimod晶型1的制备方法,其特征在于:将Ponesimod溶于环醚类溶剂中形成溶液,然后向溶液中加入烷烃类溶剂,析出固体得到Ponesimod晶型1。
[权利要求 17]
一种药用组合物,包含有效量的Ponesimod及药学上可接受的辅料,其特征在于:所述Ponesimod为选自权利要求1至4中的任一项所述的Ponesimod晶型2、权利要求7至10中的任一项所述的Ponesimod晶型3、权利要求14至15中的任一项所述的Ponesimod晶型1中的一种或多种的组合。
[权利要求 18]
根据权利要求17所述的药用组合物,其特征在于,所述药用组合物为治疗银屑病药物。
[权利要求 19]
权利要求1至4中的任一项所述的Ponesimod晶型2、权利要求7至10中的任一项所述的Ponesimod晶型3、权利要求14至15中的任一项所述的Ponesimod晶型1中的一种或多种的组合在制备治疗银屑病药物中的应用。

附图

[ 图 0001]  
[ 图 0002]  
[ 图 0003]  
[ 图 0004]  
[ 图 0005]  
[ 图 0006]  
[ 图 0007]  
[ 图 0008]  
[ 图 0009]  
[ 图 0010]