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1. (WO2019046540) METHODS AND COMPOSITIONS COMPRISING CRISPR-CPF1 AND PAIRED GUIDE CRISPR RNAS FOR PROGRAMMABLE GENOMIC DELETIONS
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Veröff.-Nr.: WO/2019/046540 Internationale Anmeldenummer PCT/US2018/048767
Veröffentlichungsdatum: 07.03.2019 Internationales Anmeldedatum: 30.08.2018
IPC:
C12N 15/11 (2006.01) ,C12N 15/82 (2006.01) ,C12N 15/85 (2006.01)
C Chemie; Hüttenwesen
12
Biochemie; Bier; Spirituosen; Wein; Essig; Mikrobiologie; Enzymologie; Mutation oder genetische Techniken
N
Mikroorganismen oder Enzyme; Zusammensetzungen aus Mikroorganismen oder Enzymen; Züchten, Konservieren oder Lebensfähigerhalten von Mikroorganismen; Mutation oder genetische Verfahrenstechnik; Kulturmedien
15
Mutation oder genetische Verfahrenstechnik; DNA oder RNA, die genetische Verfahrenstechnik betreffend, Vektoren, z.B. Plasmide, oder ihre Isolierung, Herstellung oder Reinigung; Gebrauch von Wirten hierfür
09
Rekombinante DNA-Technologie
11
DNA oder RNA Fragmente; Modifizierte Formen davon
C Chemie; Hüttenwesen
12
Biochemie; Bier; Spirituosen; Wein; Essig; Mikrobiologie; Enzymologie; Mutation oder genetische Techniken
N
Mikroorganismen oder Enzyme; Zusammensetzungen aus Mikroorganismen oder Enzymen; Züchten, Konservieren oder Lebensfähigerhalten von Mikroorganismen; Mutation oder genetische Verfahrenstechnik; Kulturmedien
15
Mutation oder genetische Verfahrenstechnik; DNA oder RNA, die genetische Verfahrenstechnik betreffend, Vektoren, z.B. Plasmide, oder ihre Isolierung, Herstellung oder Reinigung; Gebrauch von Wirten hierfür
09
Rekombinante DNA-Technologie
63
Einschleusen von fremdem genetischem Material unter Verwendung von Vektoren; Vektoren; Verwendung von Wirten dafür; Regulation der Expression
79
Vektoren oder Expressionssysteme, die speziell für eukaryontische Wirte geeignet sind
82
für Pflanzenzellen
C Chemie; Hüttenwesen
12
Biochemie; Bier; Spirituosen; Wein; Essig; Mikrobiologie; Enzymologie; Mutation oder genetische Techniken
N
Mikroorganismen oder Enzyme; Zusammensetzungen aus Mikroorganismen oder Enzymen; Züchten, Konservieren oder Lebensfähigerhalten von Mikroorganismen; Mutation oder genetische Verfahrenstechnik; Kulturmedien
15
Mutation oder genetische Verfahrenstechnik; DNA oder RNA, die genetische Verfahrenstechnik betreffend, Vektoren, z.B. Plasmide, oder ihre Isolierung, Herstellung oder Reinigung; Gebrauch von Wirten hierfür
09
Rekombinante DNA-Technologie
63
Einschleusen von fremdem genetischem Material unter Verwendung von Vektoren; Vektoren; Verwendung von Wirten dafür; Regulation der Expression
79
Vektoren oder Expressionssysteme, die speziell für eukaryontische Wirte geeignet sind
85
für Tierzellen
Anmelder:
NEW YORK GENOME CENTER, INC. [US/US]; 101 Avenue Of The Americas New York, NY 10013, US
NEW YORK UNIVERSITY [US/US]; 70 Washington Square South New York, NY 10012, US
Erfinder:
SANJANA, Neville, Espi; US
Vertreter:
BAK, Mary E.; US
KODROFF, Cathy, A.; US
DUMINIAK, Robert, J.; US
BAK, Mary, E.; US
Prioritätsdaten:
62/552,81631.08.2017US
Titel (EN) METHODS AND COMPOSITIONS COMPRISING CRISPR-CPF1 AND PAIRED GUIDE CRISPR RNAS FOR PROGRAMMABLE GENOMIC DELETIONS
(FR) PROCÉDÉS ET COMPOSITIONS COMPRENANT CRISPR-CPF1 ET DES ARN CRISPR DE GUIDAGE APPARIÉS DESTINÉS À DES DÉLÉTIONS GÉNOMIQUES PROGRAMMABLES
Zusammenfassung:
(EN) Described are methods comprises transducing a mammalian cell with one or more virus vectors. Each vector comprises a nucleic acid sequence encoding a Cpfl (also known as Casl2a) protein and an optional selectable marker in operative association with an RNA pol II promoter which controls expression thereof; and a CRISPR RNA (crRNA) array comprising at least two spacers in operative association with an RNA pol III promoter. Each spacer encodes an RNA guide which hybridizes to a unique sequence located 3' from a T-rich protospacer-adjacent motif (PAM) in a genomic region of interest. The method further comprises culturing the transduced cells, thereby providing a plurality of cultured cell cultures, each cell culture comprising said deletion. Additionally, described are compositions used in methods as well as libraries generated by the methods. Such compositions comprise libraries of transduced cell cultures, viral vectors, nucleic acid sequences, CRISPR RNA spacers, and RNA guides, as described herein.
(FR) L'invention concerne des procédés comprenant la transduction d'une cellule de mammifère avec un ou plusieurs vecteurs de virus. Chaque vecteur comprend une séquence d'acide nucléique codant pour une protéine Cpfl (également connue sous le nom de Casl2a) et un marqueur sélectionnable éventuel en association fonctionnelle avec un promoteur pol II d'ARN, qui commande l'expression de cette dernière ; et un réseau d'ARN CRISPR (ARNcr) comprenant au moins deux espaceurs en association fonctionnelle avec un promoteur pol III d'ARN. Chaque espaceur code pour un guide d'ARN qui s'hybride à une séquence unique située à 3' à partir d'un motif adjacent au proto-espaceur (PAM) riche en T dans une région génomique d'intérêt. Le procédé comprend en outre la culture des cellules transduites, ce qui permet d'obtenir une pluralité de cultures de cellules cultivées, chaque culture de cellules comprenant ladite délétion. De plus, l'invention concerne des compositions utilisées dans des procédés ainsi que des bibliothèques générées par les procédés. De telles compositions comprennent des bibliothèques de cultures de cellules transduites, des vecteurs viraux, des séquences d'acides nucléiques, des espaceurs d'ARN CRISPR et des guides d'ARN, tels que décrits ici.
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Veröffentlichungssprache: Englisch (EN)
Anmeldesprache: Englisch (EN)