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1. (WO2015197692) VERFAHREN ZUR ANREICHERUNG VON MIKROVESIKELN
Aktuellste beim Internationalen Büro vorliegende bibliographische Daten   

Veröff.-Nr.: WO/2015/197692 Internationale Anmeldenummer PCT/EP2015/064256
Veröffentlichungsdatum: 30.12.2015 Internationales Anmeldedatum: 24.06.2015
IPC:
C12N 15/10 (2006.01)
Anmelder: AJ INNUSCREEN GMBH[DE/DE]; Robert-Roessle-Str. 10 13125 Berlin, DE
Erfinder: HILLEBRAND, Timo; DE
Vertreter: WEHLAN, Helmut; DE
Prioritätsdaten:
10 2014 212 126.424.06.2014DE
Titel (EN) METHOD FOR ENRICHING MICROVESICLES
(FR) PROCÉDÉ D'ENRICHISSEMENT DE MICROVÉSICULES
(DE) VERFAHREN ZUR ANREICHERUNG VON MIKROVESIKELN
Zusammenfassung:
(EN) The invention relates to a simple method for enriching microvesicles from a sample (e.g. exosomes) in order to subsequently isolate the biomolecules, especially RNA, contained in the microvesicles and optionally detect same in a sensitive manner. The method comprises the following steps: a) adding an aqueous solution of a salt of a polyuronic acid to the sample; b) adding a substance which induces gel formation / pellet formation of the polyuronic acid; c) mixing the sample and brief incubation; d) subjecting the sample to centrifugation and removing the supernatant; e) dissolving the pellet or gel piece; f) isolating the ingredients, preferably RNA, biomolecules contained in the microvesicles in a known fashion. The preferred salt used is alginate.
(FR) L'invention concerne un procédé simple d'enrichissement de microvésicules provenant d'un échantillon (par exemple des exosomes) en vue d'isoler ultérieurement les biomolécules contenues dans lesdites microvésicules, en particulier de l'ARN, et le cas échéant en vue d'une détection sensible. Le procédé comprend les étapes consistant à : a) ajouter à l'échantillon une solution aqueuse d'un sel d'un acide polyuronique, b) ajouter une substance qui induit la formation d'un gel / d'une boulette de l'acide polyuronique, c) homogénéiser et incuber brièvement l'échantillon, d) centrifuger l'échantillon et éliminer le surnageant, e) désagréger la boulette ou le fragment de gel, f) isoler les constituants contenus dans les microvésicules, de préférence de l'ARN, des biomolécules, d'une manière en soi connue. Le sel utilisé préférentiellement est un alginate.
(DE) Gegenstand der Erfindung ist ein einfaches Verfahren zur Anreicherung von Mikrovesikeln aus einer Probe (z.B. Exosomen) für die nachfolgende Isolierung der in den Mikrovesikeln enthaltenen Biomoleküle, insbesondere RNA und ggf. sensitive Detektion. Das Verfahren umfasst folgende Schritte: a) Zugabe einer wässrigen Lösung eines Salzes einer Polyuronsäure zur Probe, b) Zugabe einer Substanz, welche die Gelbildung/Pelletbildung der Polyuronsäure induziert, c) Mischen der Probe und kurze Inkubation, d) Zentrifugation der Probe und Entfernung des Überstandes, e) Auflösen des Pellets oder Gelstückchens, f) Isolierung der in den Mikrovesikeln enthaltenen Inhaltsstoffe, vorzugsweise RNA, Biomoleküle in an sich bekannter Art und Weise. Als bevorzugtes Salz wird Alginat verwendet.
Designierte Staaten: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
African Regional Intellectual Property Organization (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasische Patentorganisation (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
Europäisches Patentamt (EPO) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
Veröffentlichungssprache: Deutsch (DE)
Anmeldesprache: Deutsch (DE)