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1. (WO2013110408) MIKROSKOP UND VERFAHREN FÜR DIE HOCHAUFLÖSENDE 3-D FLUORESZENZMIKROSKOPIE
Aktuellste beim Internationalen Büro vorliegende bibliographische Daten   

TranslationÜbersetzung: Original-->Deutsch
Veröff.-Nr.:    WO/2013/110408    Internationale Anmeldenummer    PCT/EP2012/075465
Veröffentlichungsdatum: 01.08.2013 Internationales Anmeldedatum: 13.12.2012
IPC:
G02B 21/16 (2006.01), G02B 21/36 (2006.01), G02B 27/58 (2006.01), G01N 21/64 (2006.01)
Anmelder: CARL ZEISS MICROSCOPY GMBH [DE/DE]; Carl-Zeiss-Promenade 10 07745 Jena (DE)
Erfinder: KALKBRENNER, Thomas; (DE).
WOLLESCHENSKY, Ralf; (DE)
Vertreter: GEYER, FEHNERS & PARTNER; Perhamerstraße 31 80687 München (DE)
Prioritätsdaten:
10 2012 201 003.3 24.01.2012 DE
Titel (DE) MIKROSKOP UND VERFAHREN FÜR DIE HOCHAUFLÖSENDE 3-D FLUORESZENZMIKROSKOPIE
(EN) MICROSCOPE AND METHOD FOR HIGH-RESOLUTION 3D FLUORESCENCE MICROSCOPY
(FR) MICROSCOPE ET PROCÉDÉ DE MICROSCOPIE À FLUORESCENCE 3D HAUTE RÉSOLUTION
Zusammenfassung: front page image
(DE)Verfahren zur hochauflösenden 3D-Fluoreszenzmikroskopie, wobei - in einer Probe (2) wiederholt Fluoreszenzemitter zur Abgabe von Fluoreszenzstrahlung angeregt und von der Probe (2) mit einem Mikroskop (1), das einen Abbildungsstrahlengang (4) mit einer optischen Auflösung und eine Fokalebene aufweist, Einzelbilder (10) erzeugt werden, wobei die Fluoreszenzemitter derart zur Abgabe von Fluoreszenzstrahlung angeregt werden, dass zumindest eine Teilmenge der Fluoreszenzemitter in jedem Einzelbild (10) derart isoliert ist, so dass die Bilder (11) dieser Fluoreszenzemitter im Rahmen der optischen Auflösung in den Einzelbildern (10) trennbar sind, - in den erzeugten Einzelbildern (10) aus den Bildern der isolierten Fluoreszenzemitter die Lagen dieser Fluoreszenzemitter mit einer über eine optische Auflösung hinaus gehenden Ortsgenauigkeit lokalisiert werden und daraus ein hochaufgelöstes Gesamtbild erzeugt wird, - jedes Einzelbild mittels eines Teilerelements (7) in ein erstes und ein zweites Teilbild (12, 13) aufgeteilt wird, wobei das erste Teilbild (12) eine erste Fokalebene in der Probe (2) und das zweite Teilbild (13) eine zweite Fokalebene in der Probe (2) abbildet, - beide Teilbilder (12, 13) getrennt abgebildet werden, dadurch gekennzeichnet, dass - als Teilerelement ein adaptiver Spiegel (7) verwendet und im wesentlichen in einer Pupille des Abbildungsstrahlengangs (4) angeordnet wird, - der adaptive Spiegel (7) so eingestellt wird, dass er die zwei Teilbilder (12, 13) zeitlich oder örtlich getrennt abbildet, und - der adaptive Spiegel (7) so eingestellt wird, dass er zwei unterschiedliche Fokuslängen für die beiden Teilbilder (12, 13) realisiert.
(EN)A method for high-resolution 3D fluorescence microscopy, wherein fluorescence emitters in a sample (2) are repeatedly excited to emit fluorescence and individual images (10) are generated from the sample (2) using a microscope (1) that has an imaging beam path (4) having an optical resolution and a focal plane, wherein the fluorescence emitters are excited to emit fluorescence in such a way that at least some of the fluorescence emitters are isolated in each individual image (10) in such a way that the images (11) of these fluorescence emitters can be separated into individual images (10) during optical resolution; in the individual images (10) generated from the images of the isolated fluorescence emitters, the layers of these fluorescence emitters are localised with a location precision that exceeds the optical resolution and a high-resolution overall image is generated, each individual image being divided into a first and second partial image (12, 13) by means of a divider element (7), wherein the first partial image (12) represents a first focal plane of the sample (2) and the second partial image (13) represents a second focal plane in the sample (2), and both partial images (12, 13) are shown separately, characterised in that an adaptive mirror (7) is used as a divider element and is arranged substantially in a pupil of the imaging beam path (4), said adaptive mirror (7) being adjusted such that it shows two partial images (12, 13) temporally or locally separated, said adaptive mirror (7) being adjusted such that it provides two different focal lengths for the two partial images (12, 13).
(FR)La présente invention concerne un procédé de microscopie à fluorescence 3D haute résolution. Dans un échantillon (2), des émetteurs de fluorescence sont excités répétitivement pour émettre un rayonnement fluorescent, et l'échantillon (2) génère des images distinctes (10) au moyen d'un microscope (1) qui présente une marche des rayons d'image (4) ayant une résolution optique et un plan focal. Les émetteurs de fluorescence sont excités pour émettre un rayonnement fluorescent de telle sorte qu'au moins une partie des émetteurs de fluorescence est isolée dans chaque image distincte (10) de manière telle que les images (11) de ces émetteurs de fluorescence peuvent être séparées dans le cadre de la résolution optique dans les images distinctes (10), que les positions de ces émetteurs de fluorescence sont localisées, dans les images distinctes générées (10), à partir des images des émetteurs de fluorescence isolées, avec une précision locale supérieure à une résolution optique, et que, sur cette base, une image d'ensemble haute résolution est générée. Chaque image distincte est séparée au moyen d'un élément séparateur (7) en une première sous-image et une deuxième sous-image (12, 13). La première sous-image (12) représente un premier plan focal dans l'échantillon (2), et la deuxième sous-image (13) représente un deuxième plan focal dans l'échantillon (2), les deux sous-images (12, 13) étant représentées séparément. Ce procédé est caractérisé en ce qu'un miroir adaptable (7) est utilisé en tant qu'élément séparateur et est situé sensiblement dans une pupille de la marche des rayons d'image (4), en ce que le miroir adaptable (7) est ajusté de manière à pouvoir reproduire séparément les deux sous-images (12, 13) dans le temps ou dans l'espace, et en ce que le miroir adaptatif (7) est ajusté de manière à pouvoir réaliser deux longueurs focales différentes pour les deux sous-images (12, 13).
Designierte Staaten: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Veröffentlichungssprache: German (DE)
Anmeldesprache: German (DE)