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1. WO2010072821 - NUKLEINSÄUREAUFREINIGUNGSVERFAHREN

Veröffentlichungsnummer WO/2010/072821
Veröffentlichungsdatum 01.07.2010
Internationales Aktenzeichen PCT/EP2009/067878
Internationales Anmeldedatum 23.12.2009
IPC
C12N 15/10 2006.1
CSektion C Chemie; Hüttenwesen
12Biochemie; Bier; Spirituosen; Wein; Essig; Mikrobiologie; Enzymologie; Mutation oder genetische Techniken
NMikroorganismen oder Enzyme; Zusammensetzungen aus Mikroorganismen oder Enzymen; Züchten, Konservieren oder Lebensfähigerhalten von Mikroorganismen; Mutation oder genetische Verfahrenstechnik; Kulturmedien
15Mutation oder genetische Verfahrenstechnik; DNA oder RNA, die genetische Verfahrenstechnik betreffend, Vektoren, z.B. Plasmide, oder ihre Isolierung, Herstellung oder Reinigung; Gebrauch von Wirten hierfür
09Rekombinante DNA-Technologie
10Prozesse für die Isolierung, Herstellung oder Reinigung von DNA oder RNA
CPC
C12N 15/101
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
10Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
1003Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor
1006by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers
101by chromatography, e.g. electrophoresis, ion-exchange, reverse phase
Anmelder
  • QIAGEN GmbH [DE]/[DE] (AllExceptUS)
  • FABIS, Roland [DE]/[DE] (UsOnly)
  • PETZEL, Jan [DE]/[DE] (UsOnly)
  • JENNRICH, Sabine [DE]/[DE] (UsOnly)
Erfinder
  • FABIS, Roland
  • PETZEL, Jan
  • JENNRICH, Sabine
Prioritätsdaten
10 2008 063 003.923.12.2008DE
Veröffentlichungssprache Deutsch (de)
Anmeldesprache Deutsch (DE)
Designierte Staaten
Titel
(DE) NUKLEINSÄUREAUFREINIGUNGSVERFAHREN
(EN) NUCLEIC ACID PURIFICATION METHOD
(FR) PROCÉDÉ DE PURIFICATION D'ACIDES NUCLÉIQUES
Zusammenfassung
(DE) Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Aufreinigung von Nukleinsäuren aus einer nukleinsäurehaltigen Probe, das wenigstens die nachfolgenden Schritte aufweist: a. Inkontaktbringen der nukleinsäurehaltigen Probe mit einer protonierbare Gruppen aufweisenden nukleinsäurebindenden Phase, wobei die protonierbaren Gruppen einen pKs-Wert von 9 bis 12 aufweisen; b. Bindung der Nukleinsäuren an die nukleinsäurebindende Phase bei einem pH-Wert (Bindungs pH Wert), der wenigstens eine pH Einheit unterhalb des pKs-Wertes wenigstens einer der protonierbaren Gruppen liegt; c. Elution der Nukleinsäuren bei einem pH-Wert, der oberhalb des Bindungs pH Wertes liegt, jedoch wenigstens eine pH-Einheit unterhalb des pKs-Wertes wenigstens einer der protonierbaren Gruppen liegt. Darüber hinaus werden entsprechende Kits sowie nukleinsäurebindende Phasen, die zur Aufreinigung von Nukleinsäuren eingesetzt werden können, offenbart.
(EN) The present invention relates to a method for purifying nucleic acids from a sample containing nucleic acids, the method comprising at least the following steps: a. bringing the sample containing nucleic acids into contact with a nucleic acid binding phase comprising protonatable groups, wherein the protonatable groups have a pKs value of 9 to 12; b. binding the nucleic acids to the nucleic acid phase at a pH (binding pH) that is at least one pH unit less than the pKs value of at least one of the protonatable groups; c. eluting the nucleic acids at a pH greater than the binding pH but at least one pH unit less than the pKs value of at least one of the protonatable groups. Also disclosed are corresponding kits and nucleic acid binding phases that can be used for purifying nucleic acids.
(FR) La présente invention porte sur un procédé de purification d'acide nucléique à partir d'un échantillon contenant des acides nucléiques. Ce procédé comprend au moins les étapes suivantes : a. mise en contact de l'échantillon contenant des acides nucléiques avec une phase de liaison aux acides nucléiques comprenant des groupes aptes à être protonés, les groupes aptes à être protonés ayant une valeur de pKs de 9 à 12; b. liaison des acides nucléiques à la phase de liaison aux acides nucléiques pour une valeur de pH (valeur de pH de liaison) qui se situe au moins à une unité de pH au-dessous de la valeur de pKs d'au moins l'un des groupes aptes à être protonés; c. élution des acides nucléiques pour une valeur de pH qui se situe au-dessus de la valeur de pH de liaison, mais au moins à une unité de pH au-dessous de la valeur de pKs d'au moins l'un des groupes aptes à être protonés. L'invention porte également sur des kits correspondants ainsi que sur des phases de liaison aux acides nucléiques, qui peuvent être utilisées pour la purification d'acides nucléiques.
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