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1. (WO2009027471) VERFAHREN ZUR STEIGERUNG VON PROTEINTITERN
Aktuellste beim Internationalen Büro vorliegende bibliographische Daten   

TranslationÜbersetzung: Original-->Deutsch
Veröff.-Nr.:    WO/2009/027471    Internationale Veröffentlichungsnummer:    PCT/EP2008/061310
Veröffentlichungsdatum: 05.03.2009 Internationales Anmeldedatum: 28.08.2008
IPC:
C12N 15/13 (2006.01), C12N 15/85 (2006.01), C07K 16/00 (2006.01), C07K 14/505 (2006.01), C12N 9/72 (2006.01)
Anmelder: BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG [DE/DE]; Binger Strasse 173, 55216 Ingelheim am Rhein (DE) (For All Designated States Except US).
AMBROSIUS, Dorothee [DE/DE]; (DE) (For US Only).
ENENKEL, Barbara [DE/DE]; (DE) (For US Only).
ECKERMANN, Christian [DE/DE]; (DE) (For US Only)
Erfinder: AMBROSIUS, Dorothee; (DE).
ENENKEL, Barbara; (DE).
ECKERMANN, Christian; (DE)
Vertreter: HAMMANN, Heinz; Boehringer Ingelheim GmbH, Binger Str. 173, 55216 Ingelheim am Rhein (DE)
Prioritätsdaten:
07115227.6 29.08.2007 EP
Titel (DE) VERFAHREN ZUR STEIGERUNG VON PROTEINTITERN
(EN) METHODS FOR INCREASING PROTEIN TITERS
(FR) PROCÉDÉS D'AUGMENTATION DE TITRES DE PROTÉINES
Zusammenfassung: front page image
(DE)Die Erfindung betrifft Verfahren zur Steigerung des Titers eines Proteins von Interesse in einer Zelle sowie die verbesserte Produktion und Reinigung von optimierten Biomolekülen, deren Bestandteil u.a. die Domäne CH3 ist. Ein oftmals beobachteter Effekt bei Biomolekülen ist die Abspaltung der C-terminalen Aminosäure(n), z.B. des C-terminalen Lysins. Die zumeist unvollständige Prozessierung beispielsweise der schweren Kette von Antikörpern führt zu Produktheterogenität. Zur Vermeidung dieser Produktheterogenität wurde mittels rekombinanter DNA-Technologie das entsprechende Codon des C-terminalen Lysins der schweren Antikörperkette deletiert. Diese optimierten Antikörper führen zu einem, im Vergleich zum Wildtyp, erhöhten Produkttiter. Zusätzlich erweisen sie sich als vorteilhaft in der Reinigung durch ein besseres Elutionsverhalten aufgrund der reduzierten Ladungsheterogenität.
(EN)The invention relates to methods for increasing the titer of a protein of interest in a cell as well as enhancing production and purification of optimized biomolecules, the component of which is, inter alia, the CH3 domain. In biomolecules, the C-terminal amino acid(s), e.g. the C-terminal lysine, frequently separate(s). The mostly incomplete processing of, for example, the heavy chain of antibodies results in products being heterogeneous. In order to avoid said product heterogeneity, the respective codon of the C-terminal lysine of the heavy antibody chain is deleted using recombinant DNA technology. Said optimized antibodies result in an increased product titer than in the wild type. In addition, said optimized antibodies are advantageous in the purification process as a result of an improved elution behavior due to the reduced charge heterogeneity.
(FR)L'invention concerne des procédés d'augmentation du titre d'une protéine d'intérêt dans une cellule, et la production et le lavage améliorés de biomolécules optimisées notamment composées du domaine CH3. La séparation des acides aminés à terminaison C, par ex. de la lysine à terminaison C est un effet souvent constaté sur les biomolécules. Le traitement généralement incomplet de la chaîne lourde d'anticorps, par exemple, entraîne l'hétérogénéité du produit. Pour éviter cette hétérogénéité du produit, le codon correspondant de la lysine à terminaison C de la chaîne d'anticorps lourde à été supprimé à l'aide d'ADN de recombinaison. Ces anticorps optimisés entraînent un titre de produit augmenté par rapport au type sauvage. Ces anticorps se révèlent également avantageux dans le lavage du fait d'un meilleur comportement d'élution dû à l'hétérogénéité de charge réduite.
Designierte Staaten: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MT, NL, NO, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Veröffentlichungssprache: German (DE)
Anmeldesprache: German (DE)