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1. (WO2003040286) IMMUNMODULATION DURCH DAS CDW92 MOLEKÜL
Aktuellste beim Internationalen Büro vorliegende bibliographische Daten   

TranslationÜbersetzung: Original-->Deutsch
Veröff.-Nr.:    WO/2003/040286    Internationale Veröffentlichungsnummer:    PCT/AT2002/000312
Veröffentlichungsdatum: 15.05.2003 Internationales Anmeldedatum: 06.11.2002
Antrag nach Kapitel 2 eingegangen:    10.04.2003    
IPC:
C07K 14/47 (2006.01), C07K 14/705 (2006.01), C12N 15/12 (2006.01)
Anmelder: BMT MEDIZINISCHE FORSCHUNG UND ENTWICKLUNG GMBH [AT/AT]; Brunner Strasse 59, A-1235 Wien (AT) (For All Designated States Except US).
STOCKINGER, Hannes [AT/AT]; (AT) (For US Only).
WILLE, Stefan [AT/AT]; (AT) (For US Only).
SZEKERES, Andreas [AT/AT]; (AT) (For US Only).
MAJDIC, Otto [AT/AT]; (AT) (For US Only).
PRAGER, Elisabeth [AT/AT]; (AT) (For US Only).
STAFFLER, Günther [AT/AT]; (AT) (For US Only).
STÖCKL, Johannes [AT/AT]; (AT) (For US Only).
KUNTHALERT, Duangkamol [TH/TH]; (TH) (For US Only).
PRIESCHL, Eva, E. [AT/AT]; (AT) (For US Only).
BAUMRUKER, Thomas [AT/AT]; (AT) (For US Only).
BURTSCHER, Helmut [AT/AT]; (AT) (For US Only).
ZLABINGER, Gerhard, J. [AT/AT]; (AT) (For US Only).
KNAPP, Walter [AT/AT]; (AT) (For US Only)
Erfinder: STOCKINGER, Hannes; (AT).
WILLE, Stefan; (AT).
SZEKERES, Andreas; (AT).
MAJDIC, Otto; (AT).
PRAGER, Elisabeth; (AT).
STAFFLER, Günther; (AT).
STÖCKL, Johannes; (AT).
KUNTHALERT, Duangkamol; (TH).
PRIESCHL, Eva, E.; (AT).
BAUMRUKER, Thomas; (AT).
BURTSCHER, Helmut; (AT).
ZLABINGER, Gerhard, J.; (AT).
KNAPP, Walter; (AT)
Vertreter: BARGER, Werner; Mahlerstrasse 9, A-1010 Wien (AT)
Prioritätsdaten:
A 1744/2001 06.11.2001 AT
Titel (DE) IMMUNMODULATION DURCH DAS CDW92 MOLEKÜL
(EN) CDW92 MOLECULE INDUCED IMMUNOMODULATION
(FR) IMMUNOMODULATION PAR LA MOLECULE CDW92
Zusammenfassung: front page image
(DE)CDw92 ist ein Zelloberflächenprotein mit einer Grösse von 70kDa, das auf zahlreichen Leukozyten and Endothelzellen exprimiert ist. Die molekulare Klonierung des CDw92-Moleküls mit Hilfe eines hocheffizienten retroviralen Expressionsklonierungssystems wird hier dargelegt. Die Sequenzanalyse der CDw92-cDNA ergab eine Länge von 2679 Basenpaaren. Das offene Leseraster (ORF) mit einer Grösse von 1959 bp enthält den Code für ein Protein mit 652 AA. Bei einer Computer-gestützten Analyse der Proteinsequenz von CDw92 wurden 10 Transmembrandomänen, drei potenzielle N--Glykosylierungsstellen and ein Abschnitt im C-terminalen Bereich mit einer Verwandtschaft zu ITIM, dem 'immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif', festgestellt. Beim Vergleich der hierin offengelegten Sequenz des CDw92-Klons mit verschiedenen Datenbankeinträgen wurde festgestellt, dass es sich um eine C-terminale Variante des Human-Cholintransporter-ähnlichen Proteins 1 handelt, das zu einer vor kurzem identifizierten Familie von Oberflächenproteinen mit mehreren Transmembrandomänen gehört. Ausserdem wurde festgestellt, dass CDw92 auf der Oberfläche von Monozyten, PBLs und Endothelzellen stabil exprimiert wird, weil bisher mit verschiedenen stimulierenden Substanzen keine Modulation der Expression bei diesen Zellen nachgewiesen werden konnte. Im Gegensatz zu dieser Faktor-unabhängigen Expression von CDw92 wurde auf der Oberfläche von Monozytenabgeleiteten dendritischen Zellen (Mo-DCs) eine spezifische Regulation von CDw92 nachgewiesen. Bei Reifung der Mo-DCs unter dem Einfluss von Ionomycin oder Calciumionophor fand eine Downregulation von CDw92 statt und bei Inkubation dieser Zellen mit IL-10 eine spezifische Neuexpression. Ausserdem bewirkte die Zugabe des CDw92-mAks VIM15b zu LPS-behandelten Mo-DCs eine Steigerung der LPS-induzierten IL-10-Produktion um das 2,8-fache. Zusammenfassend belegen these Daten eine kritische Rolle des CDw92 Proteins für die Biologie und die Regulation der Funktion von Leukozyten, insbesondere von dendritischen Zellen.
(EN)CDw92 is a cell surface protein with a size of 70 kDa which is expressed on numerous leukocytes and endothelial cells. The invention relates to a method for the molecular cloning of the CDw92 molecule using a highly efficient retroviral expression cloning system. Sequence analysis of the CDw92 cDNA established a length of 2679 base pairs. The open reading frame (ORF) having a size of 1959 bp contains the code for a protein with 652 AA. A computer-assisted analysis of the protein sequence of CDw92 established 10 transmembrane domains, three potential N glycosylation sites and one section in the C-terminal domain that is related to ITM (immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif). A comparison of the sequence of the CDw92 clone hereby found with various data base entries had the result that it is a C-terminal variant of the human choline transporter-like protein 1 that belongs to a family of surface proteins with several transmembrane domains recently identified. It was furthermore found that CDw92 is stably expressed on the surface of monocytes, PBLs and endothelial cells since so far no modulation of expression could be established for these cells using various stimulating substances. Contrary to this factor-independent expression of CDw92, a specific regulation of CDw92 was detected on the surface of monocyte-derived dendritic cells (Mo-DCs). During maturation of the Mo-DCs under the influence of ionomycine or calcium ionophore a down-regulation of CDw92 was observed and a specific new expression took place when these cells were incubated with IL-10. The addition of CDw92-mAks VIM15b to LPS-treated Mo-DCs led to an increase in LPS-induced IL-10 production by 2.8. In summary, these data furnish evidence for the critical role of the CDw92 protein for the field of biology and the regulation of the function of leukocytes, especially of dendritic cells.
(FR)CDw92 est une protéine de surface cellulaire de 70kDa de dimension, exprimée par de nombreux leucocytes et de nombreuses cellules endothéliales. L'invention concerne le clonage moléculaire de la molécule CDw92 au moyen d'un système de clonage d'expression rétrovirale hautement efficace. L'analyse des séquences de cADN de CDw92 a donné une longueur de 2679 paires de bases. Le cadre ouvert de lecture (ORF) de 1959 bp de dimension comprend le code pour une protéine de 652 AA. Une analyse assistée par ordinateur de la séquence protéique de CDw92 a permis de déterminer la présence de 10 domaines transmembranaires, trois sites potentiels de glycosylation N et une section dans la zone terminale C ayant une parenté avec le motif ITIM (motif d'inhibition à base de tyrosine d'immunorécepteur). La comparaison de la séquence ainsi découverte du clone CDw92 avec différents enregistrements dans des banques de données a permis de conclure qu'il s'agit d'une variante C-terminal de la protéine 1 similaire au transporteur de choline humain, cette variante appartenant à la famille récemment identifiée de protéines de surface à plusieurs domaines transmembranaires. Il a en outre été constaté que CDw92 est exprimé de manière stable à la surface de monocytes, de PBL et de cellules endothéliales, aucune modification de l'expression sur ces cellules n'ayant pu être prouvée jusqu'à présent avec différentes substances de stimulation. Contrairement à cette expression de CDw92 indépendante d'un facteur, on a décelé une régulation spécifique de CDw92 à la surface de cellules (Mo-DC) dendritiques dérivant de monocytes. La maturation des Mo-DC sous l'effet de la ionomycine ou de l'ionophore du calcium a provoqué une insensibilisation de la cellule au facteur de CDw92 et l'incubation de ces cellules avec IL-10 a donné naissance à une nouvelle expression spécifique. De plus, l'addition de CDw92-mAks VIM15b aux Mo-DC traitées au LPS s'est traduite par une multiplication de la production d'IL-10 induite par LPS par 2,8. En résumé, les données prouvent le rôle critique de la protéine CDw92 en biologie et en matière de régulation de la fonction de leucocytes, notamment de cellules dendritiques.
Designierte Staaten: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NO, NZ, OM, PH, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
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Veröffentlichungssprache: German (DE)
Anmeldesprache: German (DE)