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1. (WO2003039703) VERFAHREN ZUM NACHWEIS VON NUKLEINSÄUREN IN FORM EINES TROCKENSCHNELLTESTES
Aktuellste beim Internationalen Büro vorliegende bibliographische Daten   

TranslationÜbersetzung: Original-->Deutsch
Veröff.-Nr.:    WO/2003/039703    Internationale Veröffentlichungsnummer:    PCT/EP2002/012333
Veröffentlichungsdatum: 15.05.2003 Internationales Anmeldedatum: 05.11.2002
IPC:
B01J 20/32 (2006.01), C12Q 1/68 (2006.01), G01N 30/90 (2006.01)
Anmelder: HAIN LIFESCIENCE GMBH [DE/DE]; Hardwiesenstraße 1, 72147 Nehren (DE) (For All Designated States Except US).
WEIZENEGGER, Michael [DE/DE]; (DE) (For US Only)
Erfinder: WEIZENEGGER, Michael; (DE)
Vertreter: GODDAR, Heinz; Boehmert & Boehmert, Pettenkoferstrasse 20-22, 80336 München (DE)
Prioritätsdaten:
101 54 291.7 05.11.2001 DE
Titel (DE) VERFAHREN ZUM NACHWEIS VON NUKLEINSÄUREN IN FORM EINES TROCKENSCHNELLTESTES
(EN) METHOD IN THE FORM OF A DRY RAPID TEST FOR DETECTING NUCLEIC ACIDS
(FR) PROCEDE POUR DETECTER DES ACIDES NUCLEIQUES AU MOYEN D'UN TEST RAPIDE A SEC
Zusammenfassung: front page image
(DE)Die vorliegende Erfindung betrifft das Gebiet der Diagnostik von Nukleinsäuren. Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist insbesondere ein hock sensitives Verfahren zum Nachweis, zur Differenzierung und zur Charakterisierung von Nukleinsäuren in Form eines Trocken-schnelltestes; der Trockenschnelltest enthaltend ein chromatographisches Material umfassend - eine Probenaufnahmezone, - eine Trennzone mit Bindungsbereich in welchem eine oder mehrere sequenzspezifische Nu-kleinsäuresonden immobilisiert sind and - eine hinter der Trennzone mit Bindungsbereich liegende Flüssigkeit absorbierende Zone, dadurch gekennzeichnet, dass die sequenzspezifischen Nukleinsäuresonden über einen Polymerlinker immobilisiert sind und weiterhin dadurch gekennzeichnet, dass das Verfahren folgende Schritte umfasst: i) die nachzuweisende Nukleinsäure wird im Falle doppelsträngiger Nukleinsäuren denaturiert und anschliessend neutralisiert,ii) die nachzuweisende Nukleinsäure wird auf die Probenaufnahmezone in einem Laufpuffer, welcher mild denaturierende Agenzien enthält, aufgetragen, iii) die nachzuweisende Nukleinsäure bewegt sich von der robenaufnahmezone in Richtung Flüssigkeit absorbierende Zone, iv) die nachzuweisende Nukleinsäure wird im Bindungsbereich der Trennstrecke mit der se-quenzspezifischen Nukleinsäuresonde in Kontakt gebracht and hybridisiert an die sequenz-spezifische Nukleinsäuresonde v) die nachzuweisende Nukleinsäure beziehungsweise die Hybridisierung der nachzuweisen-den Nukleinsäure an die sequenzspezifische Nukleinsäuresonde wird detektiert über eine Markierung, die an der nachzuweisenden Nukleinsäure angebracht ist oder über die Detektion einer Markierung des Nukleinsäuredoppelstranges. Des weiteren ist Gegenstand der vorliegenden Erfindung eine Vorrichtung zur Durchftihrung des erfindungsgemässen Verfahrens.
(EN)The invention relates to the field of diagnostics of nucleic acids, especially to a highly sensitive method for detecting, differentiating and characterizing nucleic acids in the form of a dry rapid test. The inventive dry rapid test contains a chromatographic material that comprises a sample reception zone, a separation zone including a binding area, in which one or more sequence-specific nucleic acid probes are immobilized, and a zone which absorbs a liquid down-stream of the separation zone including a binding area. According to the inventive method, the sequence-specific nucleic acid probes are immobilized via a polymer linker. The method comprises the following steps: i) denaturing, in the case of double-stranded nucleic acids, the nucleic acid to be detected and then neutralizing it, ii) applying the nucleic acid to be detected to the sample reception zone in a run buffer which contains mildly denaturing agents, iii) the nucleic acid moving from the sample reception zone in direction of the liquid-absorbing zone, (iv) contacting the nucleic acid to be detected in the binding area of the separation path with the sequence-specific nucleic acid probe and hybridizing it with the sequence-specific nucleic acid probe, v) detecting the nucleic acid or the hybridization of the nucleic acid with the sequence-specific nucleic acid probe via a label that is attached to the nucleic acid to be detected or via the detection of a label of the nucleic acid double strand. The invention further relates to a device for carrying out the method according to the invention.
(FR)L'invention concerne le dépistage d'acides nucléiques et, en particulier, un procédé de haute sensibilité pour détecter, différencier et caractériser des acides nucléiques, au moyen d'un test rapide à sec comportant un matériau chromatographique constitué des éléments suivants : - une zone de prise d'échantillon, - une zone de séparation avec un domaine de liaison dans lequel sont immobilisées une ou plusieurs sondes d'acide nucléique de séquence spécifique, et une zone située derrière la zone de séparation avec un domaine de liaison et absorbant le liquide. L'invention est caractérisée en ce que les sondes d'acide nucléique de séquence spécifique sont immobilisées par une liaison polymère, le procédé comprenant les opérations suivantes : i) l'acide nucléique à détecter est, dans le cas d'acides nucléiques à doubles chaînons, d'abord dénaturé puis neutralisé ; ii) l'acide nucléique à détecter est placé sur la zone de prise d'échantillon, dans un tampon mobile contenant des agents légèrement dénaturés ; iii) l'acide nucléique à détecter se déplace de la zone de prise d'échantillon vers la zone absorbant le liquide ; iv) l'acide nucléique à détecter entre en contact, dans le domaine de liaison de la zone de séparation, avec la sonde d'acide nucléique de séquence spécifique, avec laquelle il entre en hybridation ; v) l'acide nucléique à détecter ou l'hybridation de l'acide nucléique à détecter sur la sonde d'acide nucléique de séquence spécifique est détecté au moyen d'un marquage placé sur l'acide nucléique à détecter ou par repérage d'un marquage du double chaînon d'acide nucléique. La présente invention porte également sur un dispositif pour réaliser ledit procédé.
Designierte Staaten: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NO, NZ, OM, PH, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (GH, GM, KE, LS, MW, MZ, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE, SK, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Veröffentlichungssprache: German (DE)
Anmeldesprache: German (DE)