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1. (WO2002071072) VERFAHREN UND VORRICHTUNG ZUR AUFARBEITUNG VON PROTEINEN IN GELEN
Aktuellste beim Internationalen Büro vorliegende bibliographische Daten   

TranslationÜbersetzung: Original-->Deutsch
Veröff.-Nr.:    WO/2002/071072    Internationale Anmeldenummer    PCT/EP2002/002334
Veröffentlichungsdatum: 12.09.2002 Internationales Anmeldedatum: 04.03.2002
IPC:
B01L 3/00 (2006.01), C07K 1/12 (2006.01), C07K 1/36 (2006.01), G01N 27/447 (2006.01), G01N 33/68 (2006.01)
Anmelder: WITA PROTEOMICS AG [DE/DE]; Warthestrasse 21 14513 Teltow (DE) (AT, AU, BE, CA, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE, TR only).
KÖPKE, Andreas [DE/DE]; (DE) (For US Only).
THIES, Sascha [DE/DE]; (DE) (For US Only)
Erfinder: KÖPKE, Andreas; (DE).
THIES, Sascha; (DE)
Vertreter: ZIEBIG, Marlene, K.; Gulde Hengelhaupt Ziebig & Schneider Schützenstrasse 15-17 10117 Berlin (DE)
Prioritätsdaten:
101 11 853.8 05.03.2001 DE
Titel (DE) VERFAHREN UND VORRICHTUNG ZUR AUFARBEITUNG VON PROTEINEN IN GELEN
(EN) METHOD AND DEVICE FOR PROCESSING PROTEINS IN GELS
(FR) PROCEDE ET DISPOSITIF DE TRAITEMENT DE PROTEINES DANS DES GELS
Zusammenfassung: front page image
(DE)Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Aufarbeitung von Proteinen in Gelen, indem Gelfragmente mit Proteinen aus dem Gel isoliert, einem Proteaseverdau unterworfen und die entstandenen Spaltpeptide identifiziert werden, wobei die isolierten Protein-Gelfragmente in die entsprechende Anzahl Reaktionsgefäße einer ersten Mikrotiterplatte (Filterplatte) überführt werden, wobei die Böden der Reaktionsgefäße der Mikrotiterplatte als hydrophobe Filtermembran ausgestaltet sind, die Protein-Gelfragmente gewaschen und mit der Proteaselösung inkubiert werden, wobei nach jedem Schritt die jeweilige Lösung durch die Filtermembran abgesaugt wird. Anschließend wird die erste Mikrotiterplatte über einer zweiten Mikrotiterplatte (Auffangplatte) postiert, wobei die Reaktionsgefäße der zweiten Mikrotiterplatte konische Böden aufweisen und aus einem Material bestehen, das keine Peptide adsorbiert, und dann die an den Filtermembranen der ersten Mikrotiterplatte gebundenen Peptide mittels hydrophober Waschlösung unter Anlegen von Druck in die Reaktionsgefäße der zweiten Mikrotiterplatte eluiert und aufkonzentriert werden.
(EN)The invention relates to a method for processing proteins in gels, according to which gel fragments containing proteins are isolated from the gel, subjected to a proteolytic digestion and the cleavage peptides thus obtained are identified. The isolated protein-gel fragments are transferred to a corresponding number of reaction vessels of a first microtitre plate (filter plate), the bases of the reaction vessels of the microtitre plate being configured as hydrophobic filter membranes and the protein-gel fragments are washed and incubated with the protease solution, whereby after each step the respective solution is siphoned off through the filter membrane. The first microtitre plate is subsequently positioned above a second microtitre plate (collection plate), the reaction vessels of said second microtitre plate having conical bases and consisting of a material that does not adsorb peptides. The peptides that are attached to the filter membranes of the first microtitre plate are then eluted and concentrated using a hydrophobic washing solution by exerting a pressure in the reaction vessels of the second microtitre plate.
(FR)L'invention concerne un procédé de traitement de protéines dans des gels consistant à isoler des fragments de gels contenant des protéines par rapport aux gels, à soumettre lesdits fragments à une digestion protéolytique, et à identifier les peptides de séparation ainsi obtenus. Les fragments de gels-protéines sont transférés dans le nombre correspondant de récipients de réaction d'une première plaque de microtitrage (plaque de filtrage), les bases des récipients de réaction de la plaque de microtitrage étant conçues en tant que membranes de filtrage hydrophobes. Les fragments de gels-protéines sont ensuite lavés et incubés avec la solution protéolytique, la solution correspondante étant aspirée au travers de la membrane de filtrage après chaque étape. La première plaque de microtitrage est ensuite disposée sur une deuxième plaque de microtitrage (plaque de récupération), les récipients de réaction de la deuxième plaque de microtitrage présentant des fonds coniques et étant constitués d'un matériau n'adsorbant pas les peptides. Puis, les peptides liés aux membranes de filtrage de la première plaque de microtitrage sont finalement élués et concentrés au moyen d'une solution de lavage hydrophobe sous application d'une pression dans les récipients de réaction de la deuxième plaque de microtitrage.
Designierte Staaten: AU, CA, US.
European Patent Office (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE, TR).
Veröffentlichungssprache: German (DE)
Anmeldesprache: German (DE)