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1. (WO1995011296) VERFAHREN ZUR GEZIELTEN VERÄNDERUNG VON ENZYMEN, VERÄNDERTE ENZYME UND DEREN VERWENDUNG
Aktuellste beim Internationalen Büro vorliegende bibliographische Daten   

TranslationÜbersetzung: Original-->Deutsch
Veröff.-Nr.:    WO/1995/011296    Internationale Veröffentlichungsnummer:    PCT/EP1994/003420
Veröffentlichungsdatum: 27.04.1995 Internationales Anmeldedatum: 17.10.1994
Antrag nach Kapitel 2 eingegangen:    10.05.1995    
IPC:
C12N 9/00 (2006.01), C12N 9/06 (2006.01), C12P 7/40 (2006.01), C12P 13/04 (2006.01)
Anmelder: DEGUSSA AKTIENGESELLSCHAFT [DE/DE]; Weissfrauenstrasse 9, D-60311 Frankfurt am Main (DE) (For All Designated States Except US).
ENGEL, Paul, C. [GB/GB]; (GB) (For US Only).
RICE, David [GB/GB]; (GB) (For US Only)
Erfinder: ENGEL, Paul, C.; (GB).
RICE, David; (GB)
Prioritätsdaten:
P 43 35 448.3 18.10.1993 DE
Titel (DE) VERFAHREN ZUR GEZIELTEN VERÄNDERUNG VON ENZYMEN, VERÄNDERTE ENZYME UND DEREN VERWENDUNG
(EN) METHOD FOR CONTROLLED MODIFICATION OF ENZYMES, ENZYMES MODIFIED IN THIS WAY AND THE USE OF SUCH ENZYMES
(FR) PROCEDE DE MODIFICATION CONTROLEE D'ENZYMES, ENZYMES MODIFIEES ET UTILISATION
Zusammenfassung: front page image
(DE)Enzyme können gemeinhin entweder durch chemische Modifizierung der das Enzym bildenden Aminosäuren oder durch Mutation des das Enzym codierenden Gens verändert werden. Das erfindungsgemäße Verfahren ist dadurch gekennzeichnet, daß man nacheinander die Struktur von mindestens zwei Enzymen aus einer Gruppe von Enzymen klärt; die Bindungstaschen der Enzyme mit geklärter Struktur aus einer Gruppe vergleicht; die Aminosäuren ermittelt, die für die Bindung eines für das unveränderte Enzym bevorzugten Substrates notwendig sind; die Aminosäuren in der Bindungstasche des unveränderten Enzyms mit geklärter Struktur auswählt, welche für die Bindung eines erwünschten, vom unveränderten Enzym nicht bevorzugten Substrats zu verändern sind; die ausgewählten Aminosäuren durch Mutation eines zum Enzym gehörigen Gens verändert; und das mutierte Gen exprimiert und das gezielt veränderte Enzym isoliert. Zur Erfindung gehören auch neue veränderte Enzyme der Gruppe E.C. 1.4.1. Stereospezifische Umsetzung von Oxosäuren zu Aminosäuren und umgekehrt.
(EN)Enzymes can usually be modified either by chemically changing the amino acids which constitute the enzyme or by mutation of the gene which codes for the enzyme. The method proposed by the invention is characterized by the following successive steps: the structure of at least two enzymes from a group of enzymes is clarified; the bonding centres of the enzymes whose structures have been in this way are compared; the amino acids necessary for bonding the unmodified enzyme to a preferred substrate are determined; those amino acids at the bonding centre of the unmodified enzymes whose structure has been clarified are selected which need to be modified in order to bond the enzyme to a required substrate which is not preferred by the unmodified enzyme; the amino acids selected are modified by mutation of a gene belonging to the enzyme and the mutated gene is expressed and the modified gene isolated. Also covered by the invention are novel modified enzymes of the group E.C. 1.4.1. The invention is of particular use in the stereospecific conversion of oxyacids to amino acids and $i(vice versa).
(FR)Les enzymes peuvent généralement être modifiées par une modification chimique des acides aminés qui les constituent ou par mutation du gène codant l'enzyme. Le procédé de l'invention est caractérisé en ce que, successivement: on clarifie la structure d'au moins deux enzymes d'un groupe d'enzymes; on compare les sites de fixation des enzymes à structure clarifiée d'un groupe; on détermine les acides aminés nécessaires à la fixation sur un substrat préféré pour l'enzyme non modifiée; on sélectionne dans le site de fixation de l'enzyme non modifiée à structure clarifiée les acides aminés qui doivent être modifiés pour la fixation sur un substrat souhaité non préféré par l'enzyme non modifiée; on modifie les acides aminés sélectionnés par mutation d'un gène appartenant à l'enzyme et on exprime le gène ayant muté et on isole l'enzyme modifiée de manière contrôlée. De nouvelles enzymes modifiées du groupe E.C. 1.4.1. font également partie de l'invention. Transformation stéréospécifique d'oxacides en acides aminés et inversement.
Designierte Staaten: AM, AU, BB, BG, BR, BY, CA, CN, CZ, EE, FI, GE, HU, JP, KG, KP, KR, KZ, LK, LR, LT, LU, LV, MD, MG, MN, NO, NZ, PL, RO, RU, SI, SK, TJ, TT, UA, US, UZ, VN.
African Regional Intellectual Property Organization (KE, MW, SD, SZ)
European Patent Office (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Veröffentlichungssprache: German (DE)
Anmeldesprache: German (DE)