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1. (WO2006082059) ESTERASES FOR MONITORING PROTEIN BIOSYNTHESIS IN VITRO
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2006/082059    International Application No.:    PCT/EP2006/000927
Publication Date: 10.08.2006 International Filing Date: 02.02.2006
IPC:
C12Q 1/44 (2006.01), G01N 33/68 (2006.01)
Applicants: UNIVERSITÄT BAYREUTH [DE/DE]; Universitätsstrasse 30, 95440 Bayreuth (DE) (For All Designated States Except US).
SPRINZL, Mathias [DE/DE]; (DE) (For US Only).
AGAFONOV, Dmitry [RU/DE]; (DE) (For US Only).
RABE, Kersten [DE/DE]; (DE) (For US Only)
Inventors: SPRINZL, Mathias; (DE).
AGAFONOV, Dmitry; (DE).
RABE, Kersten; (DE)
Agent: VOSSIUS & PARTNER; Siebertstrasse 4, 81675 Munchen (DE)
Priority Data:
05002200.3 02.02.2005 EP
Title (EN) ESTERASES FOR MONITORING PROTEIN BIOSYNTHESIS IN VITRO
(FR) ESTERASES DESTINEES A SURVEILLER LA BIOSYNTHESE IN VITRO DE PROTEINES
Abstract: front page image
(EN)The present invention relates to the use of an esterase for monitoring and/or tracking the synthesis of a protein, polypeptide or peptide in a cell-free translation system or in an in vivo expression system in which the synthesis of a protein, polypeptide or peptide can occur, wherein said monitoring and/or tracking comprises the detection of the function of said esterase. The present invention further relates to a vector comprising a nucleic acid molecule coding for an esterase and expressing an esterase fusionprotein. Moreover, the present invention relates to a vector comprising a nucleic acid molecule coding for an esterase and comprising in frame at least one multiple cloning site for a further protein/polypeptide/peptide, to be expressed in form of a fusion protein comprising said esterase (esterase activity) and said further proteinaceous peptide structure. The present invention also provides for a protein, polypeptide or peptide encoded by the vectors of the present invention. Additionally, the present invention relates to a kit comprising a vector of the present invention or a nucleic acid molecule as comprised by the vectors of the present invention. Also disclosed is a method for monitoring and/or tracking the synthesis of a protein, polypeptide or peptide in a cell-free translation system or in an in vivo expression system, comprising the step of detecting the function of an esterase. The present invention also teaches a method for immobilising a protein, polypeptide or peptide comprising the steps of (a) tagging said protein, polypeptide or peptide with an esterase and (b) binding said esterase to an esterase inhibitor, wherein said esterase inhibitor is immobilized on a solid substrate. Moreover, the present invention relates to uses of the vectors of the present invention or the nucleic acid molecules comprised therein for the preparation of a kit or for monitoring and/or tracking the synthesis of a protein, polypeptide or peptide in a cell-free translation system, whereby the monitoring and/or tracking comprises the detection of the function of said esterase.
(FR)La présente invention concerne l'utilisation d'une estérase afin de surveiller et/ou de suivre la synthèse d'une protéine, d'un polypeptide ou d'un peptide dans un système de traduction sans cellule ou bien dans un système d'expression in vivo où se déroule la synthèse d'une protéine, d'un polypeptide ou d'un peptide. Ladite surveillance et/ou ledit suivi comprend la détection de la fonction de ladite estérase. La présente invention concerne: le vecteur comprenant la molécule d'acide nucléique codant pour une estérase et exprimant la protéine de fusion de l'estérase; ainsi que le vecteur renfermant la molécule d'acide nucléique codant pour une estérase et comprenant, dans un cadre, au moins un site de clonage multiple pour une autre protéine/polypeptide/peptide, qui sera alors exprimé sous l'aspect d'une protéine de fusion contenant ladite estérase (activité d'estérase) et ladite autre structure peptidique protéique. Cette invention permet également d'obtenir une protéine, un polypeptide ou un peptide codé par les vecteurs de ladite invention. De surcroît, l'invention concerne le kit comprenant le vecteur de l'invention ou la molécule d'acide nucléique se trouvant dans les vecteurs de la présente invention. Il est également prévu un procédé permettant de surveiller et/ou de suivre la synthèse d'une protéine, d'un polypeptide ou d'un peptide dans un système de traduction sans cellule ou dans un système d'expression in vivo, comprenant l'étape consistant à détecter la fonction de l'estérase. La présente invention enseigne en outre le procédé permettant d'immobiliser une protéine, un polypeptide ou un peptide. Ledit procédé comprend les étapes menant (a) au marquage de ladite protéine, polypeptide ou peptide à l'aide d'une estérase ainsi qu'à (b) la liaison de ladite estérase à un inhibiteur de cette dernière. Dans ce procédé ledit inhibiteur de l'estérase est immobilisé sur un substrat solide. De plus, la présente invention décrit l'utilisation des vecteurs de l'invention ou des molécules d'acide nucléique, se trouvant dans ces derniers, lors de la préparation d'un kit ou bien lors de la surveillance et/ou du suivi de la synthèse d'une protéine, d'un polypeptide ou d'un peptide dans un système de traduction sans cellule. Ledit système comprend la détection de la fonction de ladite estérase apparaissant lors de la surveillance et/ou du suivi.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, LY, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Org. (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (EAPO) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (EPO) (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, NL, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
African Intellectual Property Organization (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)